بررسي مقاومت آنتي بيوتيكي باكتري‌هاي گرم منفي جدا شده از فاضلاب‌هاي بيمارستاني و الگوي پلاسميدي سويه‌هاي مقاوم به چند دارو

Detection of antibiotic resistant Gram negative bacteria and plasmid profiling of multi-drug resistant isolates in hospital effluents

سابقه و هدف: فاضلاب‌هاي بيمارستاني حاوي تعداد زيادي باكتري‌هاي مقاوم به آنتي‌بيوتيك است. در ميان باكتري‌هاي مقاوم، باسيل‌هاي گرم منفي قادرند براي مدت طولاني در محيط باقي مانده و به عنوان مخازن ژن‌هاي مقاومت عمل كنند. هدف از اين مطالعه ارزيابي مقاومت آنتي‌بيوتيكي باسيل‌هاي گرم منفي فاضلاب‌هاي بيمارستاني و بررسي الگوي پلاسميدي در باكتري‌هاي مقاوم به چند دارو بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي، مقاومت آنتي‌بيوتيكي سويه‌هاي جدا شده با روش ديسك ديفيوژن بررسي شد. سويه‌هاي جدا شده مطابق با روش برگي ((Bergey شناسايي شدند و استخراج پلا سميد با روش ليز قليايي انجام شد. يافته ها: در مجموع، 320 سويه براي ارزيابي مقاومت آنتي‌بيوتيكي جدا شدند. بيشترين فراواني مربوط به باسيل‌هاي گرم منفي (5/62%) و پس از آن باسيل‌هاي گرم مثبت (4/34%) و كوكسي‌هاي گرم مثبت (1/3%) بود. بيشترين سويه‌هاي جدا شده مربوط به E. coli (33%) و پس از آن Pseudomonas aeruginosa (17%) بود. از بين باكتري‌هاي جدا شده، 200 باكتري ميله‌اي گرم منفي از لحاظ الگوي مقاومت نسبت به 8 آنتي‌بيوتيك، مورد بررسي قرار گرفتند. جنتاميسين و سفترياكسون موثرترين آنتي‌بيوتيك و آمپي‌سيلين كمترين تاثير را بر باكتري‌ها داشتند. در تمام سويه‌ها مقاومت چند دارويي مشاهده شد و 6% سويه‌ها نسبت به تمام آنتي‌بيوتيك‌ها مقاوم بودند. الكتروفورز DNA پلاسميدي سويه‌هاي فوق نشان داد كه همه آنها داراي پلاسميد با اندازه Kb 5/24- 5/1 بودند. نتيجه گيري: نتايج نشان مي‌دهد كه باكتري‌هايي با مقاومت چند دارويي در فاضلاب‌هاي بيمارستاني وجود دارند و تهديدي براي سلامت عمومي محسوب مي‌شوند.

Background: Waste effluents from hospitals contain high numbers of resistant bacteria. Among resistant strainsو Gram negative bacilli are able to survive for a long time in the environment and act as natural reservoirs of resistant genes. The aim of this study was to determine the prevalence of antibiotic resistant Gram negative bacilli and the plasmid profile of multi resistant bacteria in hospital effluents. Materials and methods: In this experimental study, the antibiotic resistance patterns of the isolated strains were assayed by disc diffusion method. The isolates were identified by biochemical methods in accordance with Bergeyʹs Manual of Systematic Bacteriology. Plasmid extraction was carried out by alkaline lysis technique. Results: A total of 320 bacterial isolates were picked from the sewage samples. Gram-negative rods represented the main bulk (62.5%), followed by Gram-positive rods (34.4%) and Gram positive cocci (3.1%). The most common isolates were Escherichia coli (33%) followed by Psudomonas aeruginosa (17 %). The gram-negative rods were tested for their susceptibility for eight antibiotics. The results showed that gentamicin and cefttriaxone were the most effective antibiotics and ampicillin had the least efficacy. The results also showed that all of the isolates were multi-drug resistant and 6% of them were resistant to all of the tested antibiotics. Isolates with high multi-drug resistance profiles were found to possess multiple plasmids with sizes in the range of 1.5 to 24.5 KB. Conclusion: The results show that the multi-drug resistant bacteria are present in the hospital waste and could be threat for public health.