مقايسه استحصال و موفقيت در تخليص سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي از دو منبع مغز استخوان و بافت چربي انسان

Comparison of Derivation and Successful Purification of Human Adipose and Bone Marrow-Mesenchymal Stem Cells

مقدمه: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي (MSCs: Mesenchymal stem cells) با داشتن مزيت‌هايي نظير قابليت توان تمايزي و اعمال آثار پاراكرين در درمان بيماري‌هاي مختلف نقش دارند. لذا استفاده از MSCs به‌عنوان ابزاري در سلول درماني، نيازمند استحصال موفق اين سلول‌ها در كمترين زمان ممكن است. مواد و روش‌ها: به همين منظور در اين مطالعه MSCs از منابع مغز استخوان و چربي انسان استخراج شده و از نظر درصد موفقيت كشت و سرعت تخليص مورد ارزيابي قرار گرفتند. براي اطمينان از اينكه سلول‌هاي استحصال شده MSCs هستند، مطالعه تمايز به سلول‌هاي چربي و سلول‌هاي استخواني به‌وسيله رنگ‌آميزي Oil Red O و Alizarin Red S و سنجش فعاليت آلكالين فسفاتازي انجام گرفت. همچنين سلول‌هاي جدا شده، از نظر نشانگرهاي اختصاصي به‌وسيله فلوسايتومتري مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج: نتايج حاكي از آن بود كه درصد موفقيت در جداسازي MSCs از بافت چربي بيشتر از بافت مغز استخوان بود و همچنين روند تخليص در MSCs جدا شده از بافت چربي در مقايسه با MSCs جدا شده از مغز استخوان به‌مدت زمان كمتري نياز دارد. همچنين نتايج ما مويد اين واقعيت بود كه استحصال MSCs از بافت چربي از دهنده‌هاي مختلف كاملاً تكرارپذير بوده و وابسته به دهنده نيست ليكن اين مساله در مورد MSCs مشتق از بافت مغز استخوان صادق نبود. نتيجه‌گيري: در مجموع نتايج اين تحقيق بيانگر اين بود كه بافت چربي در مقايسه با بافت مغز استخوان، به لحاظ درصد موفقيت در جداسازي اوليه سلول‌ها و همچنين سرعت تخليص بعدي سلول‌ها، منبع مناسب‌تري براي استخراج MSCs مي‌باشد.

Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) exhibit multiple beneficial properties in treatment of various diseases through their differentiation capacity and secretion of paracrine signals. Therefore, using MSCs as a tool for cell therapy rely on the ability of harvesting a sufficient number of cells in a short time. Methods: In this study, MSCs derived from bone marrow (BM) and adipose tissue (AD) were investigated in terms of success rate of culture and cell yields. To ensure that the isolated cells are MSCs, adipogenic and osteogenic differentiation study were performed by Oil Red O, Alizarin Red S and Alkaline Phosphatase assay, and specific surface markers expression examined by flow cytometry. Results: The results showed that successful cultureʹs rate of AD-MSCs were superior to BM-MSCs. AD-MSCs reached to confluency and passage in a shorter time (faster) and produced further amount of cells at a defined time. It was also demonstrated that the derivation of MSCs from adipose tissue were completely reproducible and not donor dependent rather than BM-MSCs. Conclusion: In conclusion, with our protocol, adipose tissues are proposed the more appropriate source for derivation of MSCs in terms of percentage of cells successfully isolated and subsequent purification as compared to bone marrow.