بررسي تنوع ژنتيكي جمعيت هاي مختلف كفشدوزكCryptolaemus montrouzieri Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae) در استان مازندران با استفاده از نشانگر مولكولي RAPD

Genetic diversity of mealybug ladybird, Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae) populations in Mazandaran province by RAPD marker

كاربرد موفقيت آميز عوامل كنترل بيولوژيك و استقرار مناسب جمعيت هاي آن ها در مناطق مختلف نيازمند آگاهي از جنبه هاي مختلف زيستي اين گونه ها است. كفشدوزك Cryptolaemus montrouzieri موثرترين دشمن طبيعي شپشك هاي آردآلود در باغ‌هاي مركبات و چايكاري هاي استان مازندران است. هدف اين تحقيق توصيف تنوع ژنتيكي اين گونه با استفاده از نشانگر RAPD در هشت جمعيت طبيعي و دو جمعيت پرورش تجارتي آن بود. در آزمايش‌ها از 22 آغازگر ده نوكليوتيدي RAPDاستفاده شد. پس از بهينه سازي شرايط واكنش PCR (دماي اتصال °C 38 بمدت يك دقيقه) و انجام آزمايش ها روي تمام جمعيت ها، محصولات با استفاده از ژل آگارز دو درصد الكتروفورز شدند. اين آغازگرها در مجموع 434 نوار قابل امتيازدهي توليد كردند كه 334 نوار (9/76 درصد) چند شكلي نشان دادند. شباهت ژنتيكي ميان جمعيت ها از 48/0 (جمعيت هاي تنكابن و فريدونكنار) تا 78/0 (جمعيت هاي چالوس و اينسكتاريوم بهشهر) متغير بود. در نتيجه گروه بندي جمعيت‌ها با روش UPGMA و با استفاده از نرم افزار NTSYS-PC، جمعيت هاي مورد بررسي در دو گروه دسته بندي شدند. در گروه اول جمعيت هاي بابلسر، رامسر، ساري، تنكابن، چالوس و نمونه‌ي انسكتاريوم بهشهر قرار داشته و گروه دوم شامل جمعيت هاي جمع آوري شده از شهرهاي قايمشهر، سوادكوه و فريدون كنار به همراه نمونه‌ي انسكتاريوم بابل بود. بر مبناي ضريب تفكيك دندروگرام حاصل، جمعيت هاي مورد مطالعه تمايز متوسطي داشتند.

Information on the various biotic aspects of biological control agents is basic need for their successful application and appropriate establishment of their populations. Cryptolaemus montrouzieri is the major natural enemy of mealybugs in citrus orchards and tea plantation of Mazandaran Province. The objective of this research was to describe the genetic diversity of eight natural and two commercial reared populations of this biological control agent by using RAPD marker. Twenty two 10-mer primers were used for the assays. After optimizing the PCR conditions (annealing temperature at 38 °C for one minute) and conducting the experiments on all populations, the PCR products were electrophoresed in a 2% agarose gel. The primers generated a total of 434 score-able bands, of which 334 (76.9%) displayed polymorphism. Genetic similarity of the populations ranged from 0.48 (between Tonekabon and Freydunkenar populations) to 0.78 (Chalus and Behshahr insectarium populations). The populations were clustered into two distinct clades by UPGMA method using NTSYS-pc software. Babolsar, Sari, Ramsar, Tonekabon, Chaluos and one reared (Behshahr insectarium) populations were classified in one clade and Ghaemshahr, Savadkooh, Freydunkenar and another reared (Babol insectarium) populations were clustered in a different clade. A moderate differentiation was resulted amongst the populations based on dendrogram coefficient.