فراواني هاپلوتايپ G691S/S904S پروتوآنكوژن RET در بيماران مبتلا به سرطان مدولاري تيروييد در جمعيت ايراني

The frequency of G691S/S904S Haplotype of RET proto-oncogene in medullary thyroid carcinoma patients in Iranian population

زمينه و هدف: سرطان مدولاری تيروييد (MTC) به دو شكل اسپوراديك (75%) موارد و ارثی (25%) بروز می‌كند. اثر جهش‌های بد معنی پروتوآنكوژن RET در پيشرفت بيماری به خوبی مشخص شده است. هدف از انجام اين مطالعه بررسی هاپلوتايپ G691S/S904S در بيماران MTC و خانواده آنها بود. روش بررسی: مطالعه حاضر در طی سال‌های 1393-1383 در مركز تحقيقات سلولی و مولكولی پژوهشكده غدد درون‌ريز و متابوليسم دانشگاه علوم پزشكی شهيد بهشتی بر روی 358 فرد شامل 213 بيمار و 145 نفر از اعضای خانواده آنها به انجام رسيد. مولكول DNA ژنوميك اين افراد از لكوسيت‌های خون محيطی به روش استاندارد نمك اشباع و پروتييناز K استخراج شد. تغييرات نوكلئوتيدی به روش PCR و Direct DNA sequencing مورد بررسی قرار گرفتند. يافته‌ها: بر اساس نتايج حاصل از سكانس DNA، 189 فرد (119 بيمار، 70 نفر اعضای خانواده) دارای جهش بدمعنی G691S (rs1799939) در اگزون 11 و جهش هم‌معنی (rs1800863) S904S در اگزون 15 پروتوآنكوژن RET بودند. فراوانی آللی هاپلوتايپ G691S/S904S در بيماران 02/35% و در اعضای خانواده آنها 92/29% بود. نتيجه‌گيری: داده‌های به‌دست آمده نشان‌دهنده فراوانی هاپلوتايپ G691S/S904S ژن RET در ميان بيماران MTC و اعضای خانواده آنها در جمعيت ايرانی می‌باشد. تغييرات نوكلئوتيدی G691S و S904S به‌طور كامل عدم تعادل پيوستگی را دارا می‌باشند. بنابراين نتايج آنها به شكل هاپلوتايپ گزارش شده است. بررسی ارتباط بين هاپلوتايپ ذكر شده و بروز بيماری MTC در مطالعات آتی می‌تواند در شناسايی اثرات احتمالی اين هاپلوتايپ موثر باشد.

Background: Medullary thyroid carcinoma (MTC) occurs in both sporadic (75%) and hereditary (25%) forms. The missense mutations of the rearranged during transfection (RET) proto-oncogene in MTC development have been well demonstrated. Several studies have been published that indicate the molecular analysis of RET gene may offer early identification of those patients at high risk to develop MTC and may provide the opportunity for early intervention. The aim of this study was to investigate frequency of G691S/S904S haplotype in MTC patients and their relatives. Methods: From 2004 to 2014, 358 participants were studied, including 213 patients (119 female, 94 male) and 145 their relatives (79 female, 66 male) in cellular and molecular research center of Shahid Beheshti Research Institute for Endocrine Sciences, Tehran, Iran. Genomic DNA was extracted from peripheral blood leucocytes using the standard Salting Out/Proteinase K method. Nucleotide change detection was performed using PCR and direct DNA sequencing methods. The RET mutations and SNPs, sequences were analyzed. Results: According to DNA sequencing results, 189 individuals (119 patients, 70 relatives) had both G691S (rs1799939) missense mutation in exon11 and S904S (rs1800863) synonymous mutation in exon 15 of RET proto-oncogene. The allele frequency of G691S/S904S haplotype was 35.02% in patients and 29.92% in their relatives. Conclusion: The obtained data showed the frequency of G691S/S904S RET gene haplotype among Iranian MTC patients and their relatives. The G691S and S904S nucleotide changes were in complete linkage disequilibrium, so the results were grouped together and referred to as G691S/S904S haplotype. This haplotype are not considered as oncogenic mutations at this time, its functional role should be investigated. Further analysis is needed to demonstrate the association between this haplotype and MTC development.