ارزيابي آسيب‌هاي كروموزومي بيماران مبتلا به سرطان مري پيش و پس از راديوتراپي با استفاده از روش آزمون ميكرونوكلئي

Cytokinesis blocked micronucleus assay for evaluation of chromosomal breaks in esophageal cancer

زمينه و هدف: راديوتراپی به‌طور اجتناب‌ناپذيری با تابش‌گيری بافت‌های نرمال همراه است. پرتو يونساز می‌تواند منجر به ايجاد آسيب در DNA سلول سالم شده و در نتيجه آن بيماران متحمل عوارض زودرس و ديررس در طی درمان می‌شوند. هدف از مطالعه حاضر بررسی تغييرات سيتوژنتيكی ايجاد شده در لنفوسيت‌های خون محيطی بيماران مبتلا به سرطان مری در طی راديوتراپی بود. روش بررسی: اين نوع مطالعه تجربی- آزمايشگاهی و آينده‌نگر در مركز راديوتراپی اميد شهرستان اروميه از فروردين تا اسفند 1391 انجام شد. نمونه‌های خون محيطی از 15 بيمار مبتلا به سرطان مری در طی سه مرحله قبل (Gy 0)، وسط ( Gy6/21) و در انتهای ( Gy2/43) درمان راديوتراپی جمع‌آوری شدند. سپس نمونه‌ها در محيط كشت كامل RPMI-1640 حاوی 1% PHA كشت داده شده و در انكوباتور نگهداری شدند. سيتوكالازين- B با غلظت نهايی μg/ml 5 به نمونه‌ها اضافه شد و در نهايت نمونه‌ها محصول‌برداری شده و برای هر نمونه لام مربوطه تهيه شد. يافته‌ها: افراد مورد مطالعه شامل هشت بيمار زن و هفت بيمار مرد مبتلا به سرطان مری با ميانگين سنی 548/11±07/70 بودند. مطالعه حاضر نشان داد كه ميانگين فراوانی ميكرونوكلئی در وسط درمان در مقايسه با نمونه‌های پيش از درمان به‌طور قابل توجهی بالاتر بود (بيشتر از چهار برابر). همچنين بررسی نمونه‌های جمع‌آوری شده در انتهای درمان، افزايش در فراوانی ميكرونوكلئی متناسب با افزايش مقدار دوز دريافتی از پرتو‌های يونيزان نشان داد (001/0=P). نتيجه‌گيری: افزايش در فراوانی ميكرونوكلئی در مراحل دوم و سوم نمونه‌گيری در اثر عملكرد پرتوهای يونيزان است بنابراين استفاده از آزمون ميكرونوكلئی در طی مراحل مختلف درمان جهت بررسی عوارض راديوتراپی بسيار كمك كننده است.

Background: Radiotherapy can cause DNA damage in normal cells, misrepaired or unrepaired double strand breaks in DNA lead to chromosomal breaks. As a result patient experience early and late effects in normal tissue during and after radiotherapy. Cytogenetic techniques can be used as a cancer predictive assay because there is an association between chromosome abnormalities and the risk of developing cancer. Also it can assess patientʹs complications during the therapy. The aim of the present study was evaluation of the cytogenetic alteration in peripheral blood lymphocytes of esophageal cancer patients treated with radiotherapy. Methods: The present study is an experimental and prospective research. It was done at radiotherapy department at Omid Center in Urmia from January to December 2012. Blood samples were obtained from 15 esophageal cancer patients, before (0 Gy), during (21.6 Gy), and after radiotherapy treatment (43.2 Gy). Blood samples were cultured in RPMI-1640 complete medium containing 1% phytohaemagglutinin and incubated in a CO2 incubator. Cytochalasin-B was added to the cultures at a final concentration of 5 µg/ml. Finally, harvesting, slide making, and analysis were performed according to standard procedures. Results: This study consisted of 15 patients, including 7 men and 8 women from 55 to 84 years old (70.07±11.548). Results indicate that, in the middle of treatment the average frequency of micronuclei increased significantly compared with their concurrent pre-treatment samples (greater than four-fold). Also, an increase in chromosome damage (MN frequency) proportional increasing radiation doses at the end of treatment was observed (P=0.001). Conclusion: Increasing in the MN frequency in the second and third stages is due to radiation effects. Thus, the use of the MN technique for assessing of the side effects in patients during the therapy is very helpful. Moreover, MN assay can be used as a predictive assay for detecting individuals (patient or healthy) with intrinsic radiosensitivity.