تشخيص مولكولي ژن هاي FOX, MOX, ACT در سويه هاي كلبسيلا پنومونيه توليد كننده بتالاكتاماز با طيف وسيع

Detection of FOX, MOX, and ACT Genes in ESBL-producing Klebsiella pneumoniae Strains

سابقه و هدف: افزايش ظهور مقاومت چند دارويی در بين ايزوله‌های بيمارستانی كلبسيلاپنومونيه، گزينه‌های درمانی را برای درمان عفونت‌های ايجاد شده به وسيله اين باكتری محدود كرده است كه در اين ميان بتالاكتامازها به عنوان يكی از مكانيسم‌های مقاومت به آنتی‌بيوتيك‌ها در اين باكتری محسوب می‌شوند. لذا هدف از اين مطالعه، تشخيص فنوتيپی بتالاكتامازهای با طيف وسيع ESBLs)، (Amp-C و شناسايی ژن‌های پلاسميدی FOX, MOX, ACT در ميان ايزوله‌های كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيماران بستری در بيمارستان‌های شهر تهران در سال‌های 93–۹۱ می‌باشد. مواد و روش‌ها: اين مطالعه توصيفی بر روی ۱۲۰ايزوله كلبسيلاپنومونيه جدا شده از بيماران بستری در بيمارستان‌های امام حسين(ع)، طالقانی و كودكان مفيد شهر تهران انجام شده است. تست‌های حساسيت ضد ميكروبی با استفاده از روش‌های ديسك ديفيوژن و ميكرودايلوشن براث بر اساس رهنمودهای CLSI انجام گرديد و تشخيص فنوتيپی آنزيم‌های Amp-C و ESBL با استفاده از كيت شركت Mast مورد بررسی قرار گرفت. شناسايی ژن‌های پلاسميدی FOX, MOX, ACT با استفاده از روش‌های PCR و Sequencingانجام گرديد. يافته‌ها: از 120ايزوله كلبسيلا پنومونيه (20 درصد) 24 حاوی آنزيم Amp-C و (56.8 درصد)68 از ايزوله‌ها حاوی بتالاكتاماز با طيف وسيع(ESBL) بودند. در اين مطالعه كليستين و تيجيسيكلين بهترين اثر را داشتند. در بين ايزوله‌ها (۱۳ درصد) ۱۶ دارای ژن ACT، (38.33 درصد) 46 دارای ژن FOX و (35.83)43 دارای ژن MOX بودند. استنتاج: شيوع آنزيم‌های مقاومت به آنتی‌بيوتيك در اين مطالعه موجب نگرانی است، از اين رو برای كنترل عفونت و جلوگيری از گسترش باكتری‌های مقاوم به دارو، نياز به مديريت دقيق در تجويز دارو و شناسايی ايزوله‌های مقاوم می‌باشد.

Background and purpose: An increasing emergence of multidrug resistance among Klebsiella pneumoniae nosocomial isolates has limited the therapeutic options for treatment. The beta-lactamases are the major defense of gram-negative bacteria against antibiotics. The aim of this study was the detection of ESBLs and Amp-C enzymes and MOX, FOX, and ACT genes in K.pneumoniae strains isolated from hospitalized patients in Tehran hospitals during 2011-2013. Materials and methods: This study was conducted in 120 K. pneumoniae isolates from Imam Hossein, Taleghani and Mofid Childrenʹs hospitals in Tehran, Iran. Antibiotic susceptibility tests were performed using Kirby-Bauer disc diffusion and Broth Microdilution methods. The detection of Amp-C and ESBLs enzymes was carried out according to CLSI guidelines. The MOX, FOX, and ACT genes were detected by PCR and sequencing methods. Results: Among 120 K. pneumoniae strains, 24 (20%) and 68(56.8%) were Amp-C and ESBL positive, respectively. In this study colistin and tigecycline were found more active than other antibiotics. ACT, FOX, and MOX genes were detected in 16 (13%), 46 (38.33%) and 43(35.83%) of the isolates, respectively. Conclusion: The prevalence of antibiotic resistance genes detected in this study is of great concern and highlights the need for infection control measures including antibacterial management and identification of resistant isolates.