مقايسه داروهاي تاليدومايد و بوتيرات سديم در تكثير و تمايز پيش سازهاي ريتروئيدي حامل جهش β-تالاسمي در محيط آزمايشگاهي

Invitro Evaluation Of The Effect Of Fetal Hemoglobin Inducer Drugs On Proliferation And Differentiation Of Erythroid Progenitors With β -Thalassemia Gene Mutation

 زمينه و هدف: شناخت مكانيسم مولكولی دخيل در افزايش سطح هموگلوبين جنينی (HbF) در استفاده از داروهای القاكننده می‌تواند به القای موثر آن كمك وافری نمايد. هدف از انجام اين تحقيق، تعيين اثر دو داروی تاليدومايد و سديم بوتيرات به عنوان داروهای القاكننده‌ی بيان HbF ، جهت شناخت مكانيسم مولكولی مرتبط با اثر دارويی در سلول‌های + 133 CD خون بند ناف حامل جهش هتروزيگوت β -تالاسمی می‌باشد.  روش بررسی: در اين مطالعه‌ی تجربی، سلول‌های + 133 CD پس از جداسازی، در محيط كشت تمايز اريتروئيدی قرار گرفتند. پس از تيمار دارويی در روز 6 از تمايز اريتروئيدی، بررسی بيان ژن‌های ماركرهای رده‌ی اريتروئيدی يعنی 71 CD و a 235 CD انجام گرفت. برای اين منظور پس از استخراج RNA از پيش سازهای اريتروئيدی در روزهای 6 و 12 تمايز اريتروئيدی و سنتز cDNA ، بيان كمی اين دو ژن با استفاده از تكنيك Real-time PCR انجام شد.  يافته‌ها: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد تاليدومايد سبب افزايش قابل توجهی در تكثير پيش سازهای اريتروئيدی در مقايسه با سديم بوتيرات و گروه كنترل، می‌گردد. همچنين تاليدومايد سبب افزايش و كاهش قابل توجهی به ترتيب در بيان ژن‌های 71 CD و a 235 CD در مقايسه با سديم بوتيرات و گروه كنترل، گرديد.  نتيجه‌گيری: با توجه به پتانسيل بالای تاليدومايد در القای بيان HbF ، به نظر می‌رسد مكانيسم‌های مولكولی دخيل در تكثير پيش سازهای اوليه اريتروئيدی نقش موثری در القای بيان HbF داشته باشند.  

 Background and Aim: Understanding the molecular mechanisms involved in the increased levels of HbF inducing drugs should be advised for effective induction. The aim of this study was to investigate the molecular effects of the drugs thalidomide and sodium butyrate considered as HbF inducer agents.  Materials and Methods: In this experimental study, CD133+ cord blood stem cells carrying mutations of heterozygous β-thalassemia were isolated and differentiated into erythroid lineage. In order to evaluate the expression of the erythroid markers, CD71 and CD235a, was analysed. For this purpose, the RNA extracted from erythroid precursors at days 6 and 12 of erythroid differentiation and cDNA synthesized, and then the expression of these genes was performed by quantitative Real-time PCR technique.  Results: The results of this study showed the significant effect of thalidomide on erythroid proliferation as compared to sodium butyrate and control group (P<0.05). Also, thalidomide significantly increased CD71expression and decreased CD235a expression as compared to sodium butyrate and control groups (P<0.05).  Conclusion : Thalidomide may play its role on HbF induction by increasing the proliferation of early erythroid precursors.