جداسازي و شناسايي فلور قارچي كشمش هاي عمده خراسان رضوي بر پايه ويژگي هاي مورفولوژيكي و مولكولي

Isolation and identification of fungi from raisins varieties in Khorasane Razavi based on morphological and molecular properties

كشمش ميوه خشك شده انگور است كه به صورت خام يا به عنوان يكي از اجزاي تشكيل دهنده مواد غذايي در محصولاتي نظير فرآورده هاي پخت استفاده مي شود. ايران يكي از صادر كنندگان اصلي كشمش در سال هاي اخير محسوب مي شود و كشمش ايران به كشورهاي مختلفي صادر مي گردد؛ ازاين رو اطمينان از كيفيت ميكروبي و ايمني اين محصول از اهميت زيادي برخوردار است. هدف از تحقيق حاضر بررسي فلور قارچي ارقام عمده كشمش در خراسان رضوي (پلويي، پيكامي و تيفي) است. به منظور جداسازي و شمارش فلور قارچي از چهار محيط كشت YGC، PDA، CA و DG18 استفاده گرديد. نتايج آماري نشان داد كه آلودگي قارچي نمونه هاي كشمش تيفي بيش از ديگر نمونه ها بود. همچنين روش خشك كردن تاثير معني داري در ميزان آلودگي قارچي نداشت. پس از خالص?سازي ايزوله?هاي جدا شده، شناسايي اوليه جدايه?هاي حاصل به روش ماكروسكوپي و ميكروسكوپي انجام شد. بر اساس نتايج بدست آمده جنس?هاي آسپرژيلوس، ‌پني?سيليوم به ترتيب فراوان?ترين قارچ?هاي جدا شده از نمونه?هاي كشمش بودند. به منظور شناسايي جدايه ها در حد گونه، قطعه bp 600 از ناحيه Internal transcribed spacer 5.8SrRNA كپك ها به روش واكنش زنجيره اي پلي مراز تكثير شده و پس از تعيين توالي در بانك اطلاعاتي NCBI مورد مقايسه و شناسايي قرار گرفت. براساس نتايج بدست-آمده نمونه هاي كشمش حاوي گونه هاي مختلفي از جنس هاي آسپرژيلوس، پني سيليوم، رايزوموكور، موكور، آلترناريا و كلادوسپوريوم بود كه در اين ميان آسپرژيلوس نيجر نيز بيشترين درصد فراواني را به خود اختصاص داد.

Raisins are dried grapes that may be eaten raw or used in cooking, baking and brewing as an ingredient. Iran is one of the major exporters of raisins in recent years and Iranian raisins are exported to many countries. It is important to ensure of microbiological quality and safety of raisins. The aim of this study was isolation and identification of mycoflora from main raisin’s varieties (Poloie, Pikami & Teiphi) produced in Khorasan Razavi Province. Four types of culture medium (Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar (YGC), Potato Dextrose Agar (PDA), Czapek Dox Agar (CA) and Dichloran Glycerol Agar (DG18)) were used for isolation. The highest contamination was found in Teiphi raisin samples. The drying method was not effect on fungi contamination. For Fungi Identification, Macroscopic and Microscopic features were investigated. The Result showed that frequently isolated fungi were Aspergillus and Penicillium species. The fragment (600 bp) of Internal Transcribed Spacer 5.8SrRNA of isolated colonies was amplified using polymerase chain reaction for identification down to the species level. According to the results, the raisins had varius species of Aspergillus, Penicillium, Rhizomucor, Mucor, Alternaria and Cladosporium. Aspergillus niger was the most abundant fungi.