مقايسه‌ي دو روش كونژوگاسيون مستقيم و غيرمستقيم به منظور توليد نانودارويي هدفمند با زيست‌سازگاري، اتصال و جذب سلولي بالاتر در درمان سرطان سينه به روش فوتوترمال‌تراپي

Comparison of direct and indirect conjugation methods to produce a targeting nanodrug with more biocompatibility, high cellular uptake and binding for photothermal therapy of breast cancer

سابقه و هدف: در حال حاضر پژوهش‌هاي بسياري روي توليد نانوداروهاي هدفمند جهت كاربرد آنها در درمان اختصاصي سرطان، انجام مي‌گيرد. در اين تحقيق، به منظور توليد نانودارويي با زيست سازگاري، اتصال و جذب سلولي بالاتر به عنوان عامل فوتوترمال‌تراپي هدفمند سرطان سينه، دو روش كونژوگاسيون مستقيم و غيرمستقيم، مقايسه گرديد. مواد و روش‌ها: نانوميله‌هاي طلا با طول موج جذبي 700 نانومتر طي دو روش مستقيم و غير مستقيم به مولكول بومبسين، كونژوگه شدند. در روش مستقيم كه روش متداول مي‌باشد، پس از اتصال كوالان بومبسين به نانوذرات طلا، نانوميله‌ها پلي‌اتيلن‌گليكوله گرديدند. در حالي كه در روش غير مستقيم، ابتدا نانوميله‌هاي طلا توسط پلي‌اتيلن‌گليكول روكش شده و سپس مولكول‌هاي بومبسين توسط پيوند كوالان به نانوذرات متصل گرديد. در مرحله‌ي آخر، دو كونژوگه‌ي حاصل از نظر پايداري در خون، زيست سازگاري، اتصال اختصاصي و جذب سلولي با يكديگر مقايسه گرديدند تا بهترين روش، جهت توليد نانو دارويي با ويژگي‌هاي بهينه، به دست آيد. يافته‌ها: نتايج اين تحقيق نشان داد هر دو نانو داروي توليد شده، پايداري بالا و مشابهي در خون دارند ولي نانو داروي توليدي به روش غيرمستقيم، زيست سازگاري بالاتري از خود نشان داد. به علاوه، نانو داروي توليد شده به روش غيرمستقيم، حدود چهار برابر اتصال و جذب سلولي بالاتري نسبت به كونژوگه‌ي روش مستقيم از خود نشان داد. نتيجه‌گيري: كونژوگاسيون غيرمستقيم، نانو دارويي با زيست سازگاري، اتصال و جذب سلولي بالاتر توليد كرده و روش مناسب‌تري جهت توليد نانو داروهاي هدفمند مي‌باشد.

Background and Aim: These nanomaterials are currently under investigation and developing for applications related to cancer therapy. To improve efficiency for targeted treatment of malignant tumors, we compare the two conjugation methods (direct and indirect) for production of bombesin-gold nanorods conjugate against gasterin release peptide receptor as a targeted photothermal therapy agent for breast tumor. Materials and Methods: Bombesin conjugated with gold nanorods using the direct and indirect methods was used. The attachment of bombesin to gold nanorods and in vitro stability of two conjugates in mouse blood was studied by UV/vis spectroscopy. Cell toxicity for both of conjugate was investigated by MTT test. Selective binding and cellular uptake studies were performed with the T47D cell line. Results obtained of two conjugates compared to introduce best conjugation method. Results: UV-vis spectroscopy confirmed the conjugation of bombesin with gold nanorods in two methods. The stability assessment proved same and high stability of two conjugates in mouse blood up to 4 h. Cytotoxicity study showed higher biocompatibility of indirect conjugate of bombesin and gold nanorods in comparison with its direct conjugate. In vitro studies showed that indirect conjugate of bombesin and gold nanorods have four-fold binding and cellular uptake in comparison with its direct conjugate. ‍Conclusion: These results show that the indirect conjugation was better than the direct conjugation to produce targeted nanodrug with low cytotoxicity, high binding and cellular uptake for photothermal therapy of breast cancer.