مطالعه اثر همزمان اپي گالوكاتچين گالات و بيسفنولA بر مورفولوژي و قدرت زيستي سلول هاي بنيادي مزانشيم مغز استخوان موش صحرايي در شرايط آزمايشگاهي

Investigation of the protective effect of epigallocatechingallat on the morphology and viability of the rat bone marrow mesenchymal stem cells following treatment with Bisphenol A

چكيده زمينه و هدف : آلاينده هاي زيست محيطي مانند بيسفنولA، علاوه بر مشكلات زيست محيطي، سلامت انسان را نيز تحت تاثير قرار مي دهد. اپي گالوكاتچين گالات به عنوان يك آنتي اكسيدان، موجب محافظت سلول ها در محيط كشت سلولي مي شود. اما هنوز اثر آن بر سميت القا شده توسط بيسفنولAبر سلول هاي بنيادي مزانشيم مشخص نشده است. هدف از انجام اين مطالعه، بررسي نقش حفاظتي اپي گالوكاتچين گالات بر اين سلول ها به دنبال تيمار با بيسفنولA (القا كننده استرس – اكسيداتيو) بود. مواد و روش ها : در اين مطالعه تجربي، سلول هاي بنيادي مزانشيم مغز استخوان رت در شرايط استريل با روش فلشينگ استخراج و در محيط كشت كامل (DMEM حاوي 15% FBS و 100 U/ml پني سيلين/ استرپتومايسين) كشت داده شد. پس از پايان پاساژ سوم سلول ها به 4 گروه كنترل، تيمار با بيسفنولA، اپي گالوكاتچين گالات + بيسفنولA و اپي گالوكاتچين گالات تقسيم و براي مدت 12، 24، 36 و 48 ساعت تيمار شد. در پايان قدرت حيات، مورفولوژي سلولي، كلسيم داخل سلولي، و ميزان تخريب DNA سلول ها مورد بررسي قرار گرفت. داده ها با روش آماري آناليز واريانس يك طرفه تحليل و تفاوت ميانگين ها در سطح 05/0 > Pمعني دار در نظر گرفته شد. نتايج : بيسفنولA موجب كاهش معني دار توانايي زيستي و كلسيم داخل سلولي شد. همچنين تغييرات مورفولوژيك مانند تخريب DNA و تغيير سيتوپلاسم در گروه تيمار شده با بيسفنولA مشاهده گرديد. اپي گالوكاتچين گالات موجب تغيير اين پارامترها در گروه بيسفنولA + اپي گالوكاتچين گالات در حد گروه كنترل شد. نتيجه گيري: اپي گالوكاتچين گالات مي تواند نقش حفاظتي در مقابل آثار سمي كاربرد بيسفنولA در سلول هاي بنيادي مزانشيم داشته باشد. كلمات كليدي : بيسفنولA، اپي گالوكاتچين گالات، سلول هاي بنيادي مزانشيم.

ABSTRACT Background and Aim:Environmental contaminantssuch asbisphenol A, in addition to theenvironmental problems can affecthuman health.Epigallocatechingallat has been found to have antioxidant and cytoprotective properties in cultured cells but itseffect on toxicity induced bybisphenol A has not yet been determined in mesenchymal stem cells. The aim of this investigation was to study the protective role of epigallocatechingallat in rat bone marrow mesenchymal stem cells following treatment with bisphenolA(an oxidative stress inducer). Material and Methods: In this experimental study, rat bone marrow mesenchymal stem cells were extracted using flashing-out method and cultured in DMEM containing 15% FBS and 100U/ml Pen/Strep. At the end of the third passage, cells were divided into 4 groups: control, bisphenolA, bisphenol A + epigallocatechingallat and epigallocatechingallat.The groups were treated for 12, 24, 36, and 48 hrs.After treatment with bisphenol A and epigallocatechingallat, viability, morphology, rate ofDNA damage and calcium content of the cells were evaluated. Datawere analyzed by one way ANOVA. p < 0.05 was considered significant. Results:Bisphenol A caused a significant reduction in the viability and calcium content of the cells. In addition, morphological changes such as nuclear breakage and chromatin condensation, as well as cytoplasm shrinkage, were observed in the group treated with bisphenol A. We found alterations in these parameters in the group of bisphenol A+ epigallocatechingallatwhich were similar to those observed in the control ones. Conclusion:Epigallocatechingallat canproducea protective roleagainst thetoxic effectsofbisphenol Ain themesenchymal stemcells. Keywords: Epigallocatechingallat,Bisphenol A,Mesenchymal stem cells