مطالعه مقايسه اي اثر آنتي بيوتيك هاي پني سيلين جي، اكسي تتراسايكلين و انروفلوكساسينبر فعاليت نوتروفيل خون محيطي گوسفند (in vitro)

Comparative study on effect of penicillin G, oxytetracyclin and enrofloxacin antibiotics on neutrophil function of the peripheral blood of sheep (in vitro)

به منظور تعيين اثر برخي آنتي بيوتيك هاي رايج در درمان عفونت هاي ميكروبي گوسفند بر فعاليت نوتروفيل ها، آزمايش حاضر به صورت in vitro طراحي و اجرا شد. در اين مطالعه نوتروفيل خالص گوسفند از نمونه خون محيطي جداسازي و با آنتي بيوتيك هاي اكسي تتراسايكلين و انروفلوكساسين (غلظت هاي صفر، 1 ، 10 ، 100 و 200 ميكروگرم در ميلي ليتر) و پني سيلين G (صفر، 250، 500، 1000، 2000 و 4000 واحد در ميلي ليتر) به مدت يك ساعت در دماي آزمايشگاه انكوبه شد. سپس در هر نمونه آزمايش فاگوسيتوز مخمر و آزمايش احياي نيتروبلوتترازوليوم (NBT) انجام شد. از رويه آماري (REML) Mixed model براي تحليل داده ها استفاده شد. مقايسه ميانگين ها با روش LSMEAN و سطح معني داري 01/0 > p در نظر گرفته شد. بر اساس نتايج به دست آمده، ميانگين درصد فاگوسيتوز و درصد NBT غلظت هاي مختلف پني سيلين G فاقد اختلاف آماري معني دار بود. ميانگين درصد فاگوسيتوز و NBT در حضور داروي انروفلوكساسين به ترتيب تا غلظت 10 و 200 ميكروگرم فاقد اثر معني دار نسبت به گروه شاهد ولي درصد فاگوسيتوز از غلظت 100 ميكروگرم و بالاتر همچنين NBT در 400 ميكروگرم به طور معني داري كاهش يافت (01/0 > p). ميانگين درصد فاگوسيتوز در حضور اكسي تتراسايكلين در غلظت mcg/ml 100 و بالاتر به طور معني دار به شدت كاهش يافت (0001/0 > p) ولي در آزمايش NBT اكسي تتراسايكلين به جز غلظت mcg/ml 1-0، در ساير غلظت ها ميزان احياي نيتروبلوتترازوليوم به طور معني دار به شدت كاهش يافته بود (0001/0 > p). بنابراين در مطالعه حاضر از لحاظ فقدان آثار منفي آنتي بيوتيك هاي مورد مطالعه بر عملكرد نوتروفيل ها، در مجموع مي توان گفت: پني سيلين G كمترين اثر مهاري را بر فعاليت نوتروفيل هاي خون محيطي گوسفند دارد. در حالي كه، اكسي تتراسايكلين فقط در سطح mcg/ml 1 > (كه شايد از لحاظ باليني در اين غلظت حتي فاقد اثر درماني باشد) فاقد اثر مهاري بر فعاليت نوتروفيل ها بود و لذا استفاده از اين دارو، نبايد در اولويت قرار گيرد.

The aim of this study was in vitro evaluation of the effects of some common antibiotics in treatment of microbial infections in sheep on in vitro function of neutrophils. Purified neutrophils of sheep incubated with different levels of oxytetracyclin and enrofloxacin (0, 1, 10, 100 and 200 mcg/ml) and penicillin G (0, 250, 500, 1000, 2000 and 4000 IU/ml) antibiotics for one hour in room temperature. Phagocytosis and nitro-blue tetrazolium reduction (NBT) percentage tested in every sample. Mixed model (REML) was used as a statistical procedure. Data means compared by LSMEAN and p < 0.01 considered statistically significant. The results showed that LSMEAN of phagocytosis and NBT percentage were not statistically significant in different levels of penicillin G. Phagocytosis and NBT percentage were statistically non-significant comparing to control group up to 10 and 200 mcg/ml (respectively) but, phagocytosis percentage from 100 mcg/ml to upper level and NBT percentage in 400 mcg/ml level were statistically significant (p < 0.01). LSMEAN of phagocytosis percentage in 100 mcg/ml (and upper) decreased dramatically for oxytetracyclin (p < 0.0001). With the exception of 0 and 1 mcg/ml of oxytetracyclin, other levels of oxytetracyclin decreased NBT percentage (p < 0.0001). Then according to the negative effects of those mentioned antibiotics on neutrophil function, we can introduce penicillin G as an antibiotic with minimum inhibitory effects on neutrophil functions (in vitro). But range of non-risk level for oxytetracyclin on neutrophil function was < 1 mcg/ml (that may be had not treating effect) then in this view, this drug is not recommended and it shouldn’t be a number one antibiotic.