بررسي اثر پروتيين نوتركيب فعال كننده نوتروفيلي (HP-NAP) از هليكوباكترپيلوري بر ميزان تكثير و بقاي ماكروفاژهاي صفاق موشي مدل بالبسي

Investigation of the effect of recombinant Neutrophil activating protein (Hp-NapA) of helicobacter pylori on proliferation and viability by peritoneal macrophage from BALB/c mice

چكيده زمينه و هدف: پروتيين فعال كننده نوتروفيلي (HP-NAP) يك آنتي ژن حفاظتي و يك فاكتور بيماري‌زايي اصلي هليكوباكتر پيلوري است. تحريك سيستم ايمني جهت درمان اين باكتري نقش كارآمد دارد. هدف مطالعه حاضر بررسي اثر پروتيين نوتركيب فعال كننده نوتروفيلي از هليكوباكتر پيلوري بر ميزان تكثير و بقاي ماكروفاژهاي صفاقي موشي مدل بالب سي مي‌باشد. مواد و روش‌ها: طي يك مطالعه تجربي – آزمايشگاهي، پروتيين نوتركيب Hp-NapA از هليكوباكتر پيلوري در محيط آزمايشگاه توليد شد. ماكروفاژهاي صفاقي موش خارج و كشت داده شد. از غلظت‌هاي مختلف پروتيين نوتركيب Hp-NapA براي تحريك ماكروفاژها استفاده شد. از روش MTT به منظور ارزيابي بقا و ميزان تكثير ماكروفاژها استفاده شد. يافته‌ها: نتايج روشن است كه تاثير افزايش دهنده تحريك از طريق پروتيين نوتركيبHp-NapA در دوز 30 ميكروگرم/ ميلي‌ليتر (01/0=p)، معني‌دار بود. ميزان بقا در دوزهاي 30 و 60 ميكروگرم در ميلي‌ليتر به طور معني‌داري از گروه كنترل بيشتر شده بود و در سري همزماني پروتيين نوتركيب به همراه ليپوپلي ساكاريد ميزان تكثير نيز در دوزهاي مشابه افزايش معني‌داري از نظر آماري نشان مي‌دهد. نتيجه‌گيري: با توجه به يافته‌هاي ما، پروتيين نوتركيب Hp-NapA داراي اثر مثبت بر ميزان تكثير، بقا و عملكرد ماكروفاژهاي صفاقي دارد. بنابراين، مفروض است كه پروتيين نوتركيب Hp-NapA مي‌تواند به عنوان ايمنومدولاتور جهت ايمني درماني مطرح شود. واژگان كليدي: تكثير سلولي، ماكروفاژها، هليكوباكتر پيلوري

Abstract Background: The neutrophil-activating protein (HP-NAP) of Helicobacter pylori is a protective antigen and a major virulence factor of this bacteria. Stimulating the immune system for helicobacter infection treatment could have an important role. The aim of study is to assess the effect of recombinant Neutrophil activating protein (Hp-NapA) of helicobacter pylori on proliferation and viability of peritoneal macrophages from BALB/c mice. Materials and Methods: In this experimental study, recombinant Hp-NapA of helicobacter pylori was produced in vitro. Mice peritoneal macrophages were purified and cultured. Different concentrations of recombinant Hp-NapA was used for macrophages stimulation. MTT assay was performed to assess the viability and proliferation of macrophages. Results: The results elucidated that the increasing effect of stimulation with recombinant Hp-NapA was significant at the dose of 30 µg/ml(p=0.01). The rate of viabitity was significantly higher than control group at the doses of 30 and 60 µg/ml and in the concurrency series of recombinant protein with lipopolysaccharid, there was a statistically significarit increase in proliferation at just these doses. Conclusion: According to our findings, recombinant Hp-NapA has a positive effect on proliferation, viability and function of peritoneal macrophages. Therefore, it is proposed that recombinant Hp-NapA can be studied as an immunomodulator for immunotherapy. Keywords: Cell proliferation, Macrophages, helicobacter pylori