بررسي تاثير لپتين بر بلوغ، لقاح و تكوين روياني تخمك‏هاي نابالغ موش در شرايط آزمايشگاهي

Investigating the Effect of Leptin on In Vitro Maturation, Fertilization and Embryonic Development of Immature Mouse Oocytes

هدف: هدف اين مطالعه بررسي تاثير لپتين بر ميزان بلوغ، لقاح و تكوين روياني تخمك‏هاي نابالغ موش در شرايط آزمايشگاهي بود. مواد و روش‏ها: تخمك‏هاي نا بالغ موش (GV) از موش‏هاي ماده NMRI جدا شده و به‏طور تصادفي درگروه‏هاي: كنترل (لپتين 0 نانوگرم بر ميلي‏ليتر )، اول (لپتين 10 نانوگرم بر ميلي‏ليتر)، دوم (لپتين50 نانوگرم بر ميلي‏ليتر) و سوم (لپتين100 نانوگرم بر ميلي‏ليتر ( قرارداده شدند. 24 ساعت بعد تخمك‏هاي بالغ شده (MII) شناسايي و با اسپرم انكوبه شده لقاح داده شدند. تكوين روياني هر 24 ساعت با استفاده از ميكروسكوپ معكوس مورد بررسي قرارگرفت. نتايج: از مجموع تخمك‏هاي GV جدا شده 1/53 درصد در گروه كنترل 2/56 درصد در گروه اول، 4/42 درصددر گروه دوم و3/38 درصد در گروه سوم به مرحله متافاز II رسيدند. ميزان GVBD، 27/31 درصد در گروه اول، 63/40 درصددر گروه دوم و39/36 درصد در گروه سوم بود كه در مقايسه با گروه كنترل 05/22 درصد تفاوت معني‏داري داشت (05/0P < ). غلظت فيزيولوژيك لپتين (10 نانوگرم بر ميلي‏ليتر) ميزان MII را در مقايسه با غلظت‏هاي بالاتر لپتين به‏صورت معني‏داري افزايش داد. درحالي‏كه ميزان وقوع GVBD در غلظت‏هاي بالاي لپتين بيشتر از غلظت فيزيولوژيك لپتين بود. نتيجه‏گيري: تفاوت معني‏داري در ميزان تاثير غلظت‏هاي مختلف لپتين بر مراحل مختلف تكوين روياني بعد از IVF در بين گروه‏هاي تيمار در مقايسه با گروه كنترل مشاهده نگرديد.

Aim: The purpose of this study was to investigate the effects of leptin on in vitro maturation, fertilization and embryonic development of immature mouse oocytes. Material and Methods: Immature oocytes were isolated from NMRI female mice and divided randomly into 4 groups: leptin 0 ng/ml (control), 10 ng/ml, 50 ng/ml, 100 ng/ml. 24 h later matured (MII) oocytes were identified and fertilized with incubated sperm. Embryonic development was investigated every 24 h using inverted microscope. Results: From isolated oocytes 53/1% in control group, 56/2% in first group,42/4% in second group and 38/3% in third group developed to MII. The rate of GVBD was 22/05% in control group, 31/27% in first group, 40/63% in second group and 36/39% in third group. The physiologic concentration of leptin (10 ng/ml) considerably increased the rate of MII when compared to other groups (p < 0.05), whereas the GVBD rate was higher in group treated with concentrations more than physiologic dose. Conclusion: When different concentration of leptin was applied after IVF, no significant effects were observed between four treatment groups in different stages of embryonic development. Keywords: Leptin, immature oocytes, maturation, fertilization, Embryonic development