عنوان مقاله :
همسانه‌سازي و بيان ناحيه اتصالي نوروتوكسين نوع B باكتري كلستريديوم بوتولينوم در باكتري E. coli
عنوان فرعي :
CLONING AND EXPRESSION OF CLOSTRIDIUM BOTULINUM TYPE B BINDING DOMAIN E. COLI
پديد آورندگان :
رضايياني، سيامك نويسنده گروه زيست شناسي دانشگاه امام حسين (ع) Rezaeiani, Siamak , ابراهيمي، فيروز نويسنده Assistant Professor, Department of Clinical Biochemistry, Biology Research Center, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran Ebrahimi, Firouz , هنري، حسين نويسنده دانشگاه امام حسين (ع) Honari, Hossein , حاجي زاده، عباس نويسنده دانشگاه امام حسين (ع Hajizade, Abbas , براتي، بابك نويسنده دانشگاه امام حسين (ع Barati, Babak
اطلاعات موجودي :
ماهنامه سال 1393 شماره 0
كليدواژه :
واكسن‌هاي توكسوييدي , CLONING , BONT/B , Expression , Vaccine , ناحيه اتصالي , نوروتوكسين بوتولينوم , همسانه‌سازي , Clostridium botulinum
چكيده فارسي :
پيش‌زمينه و هدف: سندرم بوتوليسم توسط نوروتوكسين‌هاي باكتري كلستريديوم بوتولينوم ايجاد مي‌شود. اين نوروتوكسين‌ها داراي هفت سروتيپ از A – G مي‌باشند. بهترين راه براي جلوگيري از سندرم بوتوليسم ايجاد شده توسط BONT/B استفاده از واكسن‌هاي نوتركيب ساخته‌شده‌ي ناحيه اتصالي آن مي‌باشد. چون داراي اپي توپ‌هاي كافي براي تحريك سيستم ايمني مي‌باشد.
مواد و روش‌ها: ابتدا سكانس ژن ناحيه اتصالي را از سايت NCBI گرفته شد. سپس پرايمرهاي مناسب براي آن طراحي شد. سپس باكتري كشت داده شد و ژنوم آن استخراج شد. از PCR براي تكثير ژن استفاده گرديد. ژن در وكتور pGEM-Teasy وارد شد. بعدوكتور نوتركيب وارد باكتري E. coliDH5? گرديد. سپس، زيرهمسانه‌سازي در باكتري E. coliBL21 با استفاده از وكتور بياني pET28a(+) انجام شد.
نتايج: واكنش‌هاي PCR، تعيين توالي و نتايج حاصل از آن توسط IPTG و بررسي بر روي SDS – PAGE و تاييد به روش وسترن نشان‌دهنده صحت كلونينگ و بيان بود.
نتيجه‌گيري: كلون و بيان اين كانديد واكسن با موفقيت انجام شد و پتانسيل ايمني‌زايي بايد بررسي شود.
چكيده لاتين :
Backgrounds & Aims: Botulism is caused by botulinum toxin. The best way to avoid the neurotoxin syndrome caused by BONT/B is to use recombinant vaccine made of BONT/B binding domain because binding domain has sufficient epitops to stimulate immune response.
Materials & Methods: Initially BONT/B binding domain gene sequence were obtained from GenBank. Then the primers were designed. PCR reaction was performed. Then gene was ligated to pGEM-Teasy vactor. After verifying the transformation E.coli DH5?, subcloning was done. Pet28(a)+ vector was introduced to SDS-PAGE and Western blot confirmed production of the protein.
Results: The results obtained from PCR sequencing via IPTG induction and expression analysis by SDS-PAGE and its confirmation by Western blot indicated the cloning and expression process accuracy.
Conclusion: Finally, this method may be suitable for production of recombinant vaccines without any side effects. Cloning and expression of this vaccine candidate were conducted successfully and its immunization potential should be investigated.
عنوان نشريه :
مجله پزشكي اروميه
عنوان نشريه :
مجله پزشكي اروميه
اطلاعات موجودي :
ماهنامه با شماره پیاپی 0 سال 1393
كلمات كليدي :
#تست#آزمون###امتحان
