اثر نيكل بر ساختار ناحيه كينازي گيرنده فاكتور رشد فيبروبلاستي نوع دو

THE EFFECT OF NICKEL ON THE STRUCTURE OF KINASE REGION OF TYPE 2 FIBROBLAST GROWTH FACTOR RECEPTOR

پيش‌زمينه و هدف: گيرنده‏ فاكتور رشد فيبروبلاستي نوع دو در مسير پيام‌رساني سلولي و تنظيم فرآيندهاي مهم زيستي ازجمله تمايز و تكثير سلولي نقش اساسي دارد. اختلال در انتقال پيام اين گيرنده با چندين اختلال پاتولوژيكي انساني مرتبط مي‌باشد. عوامل مختلف ازجمله فلزات سمي مي‌توانند مسيرهاي سيگنالينگ را دستخوش تغيير كنند. هدف: اين مطالعه به‌منظور اثر فلز سمي نيكل بر ساختار ناحيه كينازي رسپتور فاكتور رشد فيبروبلاستي نوع دو انجام شد. مواد و روش‏ها: در اين مطالعه تجربي پروتيين نوتركيب با استفاده از پلاسميد pLEICS-01، باكتري BL21 القاي IPTG، الكتروفورز و ستون حاوي Ni2+ -NTA بيان و خالص شد. سپس اثر نيكل تا غلظت 100 ميلي مولار بر ساختار ناحيه كينازي پروتيين با استفاده از تكنيك‌هاي دو رنگ نمايي حلقوي CD)) و اسپكتروفلوريمتري (فلويورسانس) بررسي شد. يافته‏ها: مطالعه نيكل در غلظت‌هاي زير 100 ميلي مولار بر روي ساختارهاي منظم دوم بدون تغيير ولي باعث تغيير جزيي در نشر ذاتي تريپتوفان در ساختار سوم مي‌شود. نتيجه‏گيري: ساختار اصلي و پايداري ناحيه كينازي گيرنده فاكتور رشد فيبروبلاستي نوع دو در برابر نيكل تغيير نمي‌كند.

Background & Aims: Fibroblast growth factor receptor type II (FGFR2b) is the essential factor of cellular signal transduction that regulates important biological processes including cell proliferation and differentiation. The inpairment in the signaling of these receptors is associated with several human pathology. Various factors including toxic metals can change the signaling pathways. This study was aimed to investigate the effects of Nickel as the toxic metal on the structure of FGFR2b. Materials & Methods: In this study, by using plasmid pLEICS-01, BL21 bacterial, induction of IPTG, electrophoresis and column containing Ni2+ -NTA the recombinant FGFR2b was expressed and purified. The effects of Ni concentrations under 100 mM on the structure of the protein kinase domain by Spectrofluorometer and Circular dichroism (CD) was studied. Resultas: The nickel concentrations (under 100 mM) do not have a significant impact on the regular secondary structure of the protein. But they show a minor change in natural emission of tryptophan in the tertiary structure. Conclusion: The main structure and stability kinase domain of the fibroblast growth factor receptor type II does not change by nickel.