بررسي تاثير استفاده از پلاسماي غني‌شده با پلاكت (Platelet Rich Plasma) بر تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي به استخوان

INVESTIGATING PLATELET RICH PLASMA EFFECTS ON ADIPOSE-DERIVED STROMAL CELLSPROLIFERATION AND DIFFERENTIATION TO OSTEOBLAST

پيش‌زمينه و هدف: سلول‌هاي بنيادي كشت داده‌شده در موارد زيادي به‌صورت باليني استفاده مي‌شوند، اما درباره شرايط كشت آن‌ها نگراني‌هايي وجود دارد. يكي از اين شرايط، استفاده از FBS در محيط كشت مي‌باشد. FBS تركيبي خارجي با كاربرد وسيع در سيستم‌هاي كشت سلولي است و به دليل داشتن اثرات زيان‌آور بايد از محيط كشت حذف گردد.PRP جايگزين مناسبي براي FBS در نظر گرفته مي‌شود. در اين مطالعه اثرات PRP بر روي تكثير و تمايز به استخوان سلول‌هاي بنيادي بررسي مي‌شود. مواد و روش كار: سلول‌هاي موردنظر از بافت چربي حاصل عمل ليپوساكشن استخراج و با روش فلوسايتومتري ارزيابي شدند. PRP بروش سانتريفوژ 2 مرحله‌اي تهيه و توسط روش انجماد فعال گرديد. براي بررسي تكثير و تمايز سلول‌ها به سلول‌هاي استخواني به ترتيب از آزمون‌هاي رزازورين و مينراليزاسيون استفاده گرديد. يافته‌ها: ازنظر آماري، استفاده از PRP منجر به افزايش معني‌داري در تكثير سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي و تمايزشان به استخوان در مقايسه با گروه كنترل منفي شد (001/0p < ) و اثر گروه 15 درصد PRP به‌طور معني‌داري بيشتر از گروه 10 درصد PRP شد (05/0p < ). همچنين اثر FBS در تمايز به استخوان بيشتر از PRP مي‌باشد. بحث و نتيجه‌گيري: اين يافته‌ها نشان مي‌دهد PRP روند تكثير و تمايز به استخوان را بهبود مي‌بخشد. به‌طور واضح، اثرات بيولوژيكي PRP وابسته به دوز مي‌باشد و مي‌تواند در كاربردهاي باليني جايگزين مناسبي براي FBS باشد. هرچند براي كاربرد PRP تحقيقات بيشتر، بخصوص در زمينه باليني ضروري مي‌باشد.

Background & Aims: The cultured mesenchymal stem cells (MSCs) have been applied in many clinical trials and there are some concerns about the culture conditions. One of them is related to the use of fetal bovine serum (FBS). FBS is a xoengenic supplement withadverse effects which is used widely in culture system and many attempts have been done to eliminate it. Platelet rich plasma (PRP) is a candidate in the place of FBS. Materials & Methods: Adipose-derived stromal cells (ADSCs) were isolated from liposuction tissues and cultured in ?MEM with 10 % FBS. Cells of the third passage were used for the in vitro experiments and characterized by flowcytometric analysis. PRP was obtained by two-step centrifugation and PRP sample were activated by freezing method. Resazurinand mineralization assays were used to determine the effects of PRP on cell proliferation and osteogenic differentiation. Results: Treatment with PRP resulted in a statistically significant increase cell proliferation and mineralization in comparison to negative control (P < 0.001) and that of the 15% PRP group significantly was higher than that of 10 % PRP group (P < 0.05). FBS showed the osteogenic differentiation of ADSCs better than hPRP. Conclusions: These findings indicate that PRP improves the proliferation and osteogenic differentiation of ADSCs. Obviously, the biological effects of PRP were dose-dependent and can be a useful solution for clinical applications in the place of FBS. However, for the clinical application of PRP, more research is needed such as in vivo transplantation.