بررسي تاثير اسانس الكلي گياه مرزه خوزستاني بر روي بيان ژن مرتبط با بيوفيلم اسينتوباكتربوماني(bap) به روش Real time PCR

The Study of Inhibition Effects Satureja khuzestaniea Essence against Gene Expression bap Acinetobacter baumannii with Real time PCR Technique

زمينه و اهداف: اسينتوباكتر بومانی يكی از پاتوژن های اصلی بيمارستانی است و انواع متفاوتی از عفونت ها شامل پنومونی، مننژيت و عفونت های مرتبط با خون را ايجاد می كند. مرزه خوزستانی از تيره نعنائيان بوده و عمده فعاليت ضدميكروبی اين گياه اساساً به دليل اجزای فنلی اصلی آن كارواكرول و تيمول می باشد. ژن مربوط به بيوفيلم (bap) پروتئين های اختصاصی در سطح سلول را توليد می كند كه مستقيما در تشكيل بيوفيلم وعفونت زايی اين باكتری نقش اصلی را دارد. هدف از اين مطالعه بررسی تاثير اسانس الكلی مرزه خوزستانی در بيان ژن مرتبط با بيوفيلم اسينتوباكتر بومانی بوده تا درصورت موثر بودن بتوان از آن به عنوان درمان يا مكمل درمانی در عفونت های ناشی از اين باكتری و مهار ژن ويرولانس استفاده نمود. مواد و روش كار: در مطالعه حاضر ابتدا ميزان MIC اسانس الكلی مرزه خوزستانی به روش ماكرودايلوشن عليه سويه های آسينتوباكتر بومانی كه واجد ژن bap می باشند بدست آمد . پس از مواجهه به ميزان غلظت MIC  اسانس، تغييرات بيان اين ژن به روشReal time PCR مورد بررسی قرار گرفت. يافته‌ها: آناليز اسانس الكلی مرزه خوزستانی نشان دهنده حضور 90/88% كارواكرول می باشد. اسانس الكلی اين گياه دارای MIC  0/3 (mg/ml)  می باشد. پس از انجام Real time PCR نتايج حاصل از  Ctهای بدست آمده با نرم افزار spss و آزمون one way ANOVA آناليز شده و تفاوت معنی داری بين Vales  Ct و Log10 Template molecules به ميزان P>0.05) )  مشاهده گرديد. نتيجه‌گيری: نتايج نشان دهنده كاهش بيان ژن bap  در شرايط  in vitroبه روش Real time PCR می باشد، ولی تاثيری بر بيان ژنHousekeeping DNA gyrase-A ندارد. با توجه به تاثير مهاری اسانس مرزه خوزستانی عليه ژن بيوفيلم آسينتوباكتر بومانی احتمالا بتوان از اين اسانس به عنوان مكمل درمانی عليه اين باكتری و مهار ژن ويرولانس آن استفاده نمود.

Background and Aim: Acinetobacter baumannii a major hospital pathogens and causes outbreaks of infections and associated to nosocomial infections, including bacteremia, pneumonia, meningitis, urinary tract infection, and wound infections. Satureja khuzestaniea province the group Nnayyan and Carvacrol and thymol are antimicrobial activity of this plant. Biofilm-related genes (bap)-specific proteins on the cell surface generate a direct role in biofilm formation and infection of the bacteria is eliminated. The aim of this study was to investigate the effect of alcoholic extract Satureja khuzestaniea in gene expression (bap) was A. baumanii if it can be as effective as a complementary treatment or therapy in infections caused by these bacteria and inhibit virulence genes used. Materials and Methods: In this study the effect of Satureja khuzestanica essence, an endemic plant of Iran, on the expression level of bap gene in A. baumannii   were investigated. For this purpose, MIC was determined for A. baumanii   . Then, bacteria were treated with S. khuzistanica essence. The bap genes expression in treated and non-treated bacteria, before and after treatment was evaluated using Real time PCR technique. Results: Surprisingly, the expression level of bap gene was decreased in the presence of S. khuzestanica. However, the expression of DNA gyrA gene that was used as an internal control was not altered before and after treatment with this herb. Conclusions: Based on the results, S. khuzestanica could play a, major role in lowering the A. baumannii   resistance to drugs, by reducing bap gene expression. According to results of current research we hope in future be used it to the clinic with a wider range as a complementary therapy and also for surgery operation.