توليد آنزيم آلفا آميلاز از سويه گرمادوست بوميBacillus licheniformis-AZ2 جدا سازي شده از چشمه آبگرم قينرجه در استان اردبيل

Alpha amylase production by a native thermophilic strain Bacillus licheniformis-AZ2 isolated from Qinarje Hot spring in Ardebil Province

باكتري هاي گرمادوست منابع با ارزشي ازآنزيم هاي هيدروليتيك مقاوم به دماي بالاهستند كه درصنايع مختلف داراي اهميت بسيارمي باشند. در مقايسه با سايرآنزيم هاي هيدروليزكننده نشاسته،كاربردتجاري آنزيم آلفا آميلازدرفرآوري نشاسته،تخميروتهيه محصولات كربوهيدراتي از اهميت خاصي برخوردار است وتوانسته جايگزين هيدروليزشيميايي نشاسته درفرآوري صنعتي شود. هدف ازانجام اين تحقيق تعيين شرايط مطلوب براي توليدآنزيم آلفا آميلازمقاوم به دماي بالاتوسط يك سويه باسيلوس بومي است كه به تازگي ازچشمه آبگرم قينرجه در استان اردبيل جداسازي و به نام Bacillus licheniformis-AZ2 در كلكسيون باكتريايي گروه بيوتكنولوژي كشاورزي دانشگاه بو علي سيناي همدان، شناسايي و ثبت گرديده است. در اين مطالعه با استفاده از روش رنگ آميزي يداين، امكان فعاليت آميلوليتيكي باكتري مورد بررسي قرار گرفته است. نتايج آزمايش ها نشان مي دهد كه بيشترين فعاليت زيستي سلول و توليد آنزيم در شرايط محيط كشت پايه كه بوسيله يك درصد مايه تلقيح اوليه (حجمي/حجمي) تلقيح شده بود، پس از 84 ساعت در 9=pH و دماي?C40 محقق شده است.همچنين آزمايش هاي مربوط به تعيين فعاليت آنزيم نيز نشان داد كه آنزيم توليد شده، بالا ترين فعاليت خود را در شرايط دماي ?C80 و بافر Tris- HCl با 7=pH بروز مي دهد. بر اساس اين نتايج، آنزيم توليد شده بوسيله سويه بومي (Bacillus licheniformis-AZ2) مقاوم به دماي بالابوده و داراي ويژگي هاي مورد نياز براي فرآوري نشاسته و كاربرد در صنايع غذايي مي باشد.

Thermophilic microorganisms are the main sources of valuable thermostable hydrolytic enzymes hencethey have very importance in different industries. In comparison with other amylolytic enzymes, application of alpha amylase in starch processing industries, fermentation and carbohydrate products is a great importance and they could also be substituted with chemical hydrolysis of starch in industries. Determination of optimal conditions for thermostable ?-amylase production by native strain Bacillus licheniformis was the aim of this study. Bacillus licheniformis strain has been isolated from Qinarje Hotspring (Ardebil Prov.) recently which have been identified and registered as the name of Bacillus licheniformis-AZ2 in bacterial collection of agricultural biotechnology department of Bu-Ali Sina University. In this article, possibility of the amylolytic activity of this microorganism has been evaluated using Gram’s iodine staining method. Results showed that maximum growth rate and also amylase production in basal medium conditions which was inoculated with 1% (V/V) inoculums achieved at 40?C and pH=9, 84 hours after inoculation.Amylase assay also showed that the optimum enzyme activity was achieved at 80?C and pH=7, so this enzyme has been considered to be thermostable. Our results showed that Bacilluslicheniformis-AZ2 strain produced thermostable ?-amylase with characteristics suitable for application in starch processing and other food industries.