تخليص آنزيم ليپاز از بخش قدامي روده ماهي قزل آلاي رنگين كمان (Oncorhynchus mykiss)

در سال هاي اخير آبزيان به منزله منبع استخراج آنزيم هايي مانند ليپاز مورد توجه قرار گرفته اند. امعا و احشاي ماهي قزل آلاي رنگين كمان منبع بسيار مناسبي براي جداسازي آنزيم است. در اين تحقيق، آنزيم ليپاز از بخش قدامي روده ماهي قزل آلاي رنگين كمان تخليص شد. براي تخليص، از استون براي چربي زدايي، از آمونيوم سولفات براي راسب سازي، از اولترافيلتراسيون براي تغليظ نمونه و از ستون كروماتوگرافي ژل فيلتراسيون براي جداسازي آنزيم موردنظر استفاده شد. ميزان فعاليت آنزيم ليپاز تخليص شده با استفاده از پارانيتروفنيل پالميتات به منزله سوبسترا و ميزان پروتئين اين آنزيم با استفاده از روش لوري، در مراحل مختلف تخليص سنجش شد. در اين تحقيق پارامترهايي مانند درصد بازده و ميزان تخليص نيز در هر مرحله بررسي شد. نتايج نشان داد در آخرين مرحله تخليص، ميزان فعاليت و پروتئين آنزيم به ترتيب 171/6 واحد در ميلي ليتر و 53/0 ميلي گرم در ميلي ليتر، درصد بازده تخليص برابر با 53/7 و ميزان تخليص برابر با 49/5 بود. وزن مولكولي آنزيم تخليص شده با استفاده از روش SDS-PAGE، 32 كيلو دالتون تعيين شد. بر اساس اين تحقيق مي توان نتيجه گرفت كه آنزيم ليپاز روده ماهي قزل آلاي رنگين كمان داراي كارايي مناسبي است و مي تواند در آينده به منزله ماده افزودني در صنايع مرتبط و تحقيقات بيوتكنولوژي مورد توجه قرار گيرد.