جداسازي و شناسايي آكانتامبا از آب استخرها و حوضچه‌هاي ميادين ناحيه سيستان، استان سيستان و بلوچستان

Isolation and identification of Acanthamoeba from pools water and ponds in Sistan area, Sistan Baluchestan province

چكيده: مقدمه: آكانتامبا يكي از شايع‌ترين تك‌ ياخته‌هاي آميبي موجود در محيط مي‌باشد كه مي‌تواند بيماري‌هاي انساني وخيم از جمله كراتيت آميبي و بيماري نادر و كشنده انسفاليت آميبي گرانولو ماتوز (GAE) را ايجاد كند. اين مطالعه با هدف تشخيص آكانتامبا از آب استخرها و حوضچه‌هاي ميادين ناحيه سيستان با استفاده از واكنش زنجيره اي پليمريزاسيون صورت گرفت. روش پژوهش: در اين مطالعه توصيفي مقطعي ?? نمونه از آب استخرها و حوضچه‌هاي ميادين ناحيه سيستان (زابل،زهك،هيرمند،هامون و نيمروز) در نيمه اول سال ???? جمع ‌آوري شد. نمونه‌ها از فيلترهاي كاغذي نيتروسلولز 45/0 ميكروني عبور داده شدو در محيط آگار غير مغذي 5/1 درصد پوشيده شده با باكتري اشرشيا كلي گشته شده كشت داده شد. كشت‌هاي مثبت آميب‌ ها ي آزادزي با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي جنس آكانتامبا با روش واكنش زنجيرهاي پليمريزاسيون مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته ها: از 93 نمونه آب جمع‌ آوري‌ شده از شهر‌هاي منطقه سيستان 82 نمونه (17/88 درصد) آلوده به آميب‌هاي آزاد زي بود كه از اين تعداد 39 نمونه با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي، به عنوان جنس آكانتامبا تشخيص داده شدند. شيوع آكانتامبا در كل نمونه‌هاي مورد بررسي 56/47 درصد تعيين شد. نتيجه گيري: نتايج اين تحقيق نشان داد انتشار بالاي آكانتامبا در آب استخرها و حوضچه‌هاي ميادين ناحيه سيستان مي‌تواند يك فاكتور خطر براي سلامتي افراد، خصوصاً كودكان و افراد با سيستم ايمني ناكار آمدباشد. ازاين‌جهت توجه پزشكان جهت شناسايي موارد آلودگي و تلاش متصديان بهداشتي به ‌منظور آموزش و پيشگيري از آلودگي منابع آب به روش‌هاي مناسب توصيه مي‌شود.

Abstract: Background:Acanthamoeba is one of the most common amoeba protozoa in environment that causes human chronic diseases including amoebic keratitis and rare, deadly disease granulomatus amoebic encephalitis (GAE). The aim of this study is identification of acanthamoeba in pools water and ponds of squares in Sistan by PCR Methods:In this descriptive study 93 samples of pools water and ponds of squares in Sistan area (Zabul, Zahak, Hirmand, Hamoon and Nimrouz) were collected in the first half of 2014. Samples were filtered through 0.45? paper filters of nitrocellulose and they were cultured in non-nutrient agar medium%1.5 enriched with heat killed cultured bacteria Escherichia coli. Positive cultures of free living amoebas were evaluated by PCR method. Results:Out of 93% of collected water in Sistan cities, 82 samples(88.17%) in medium were affected by free living amoebas that 39 samples of acanthamoeba genotype identified by using specialized primers. Also frequency of acanthamoeba in all of samples determined about 47.56%. Conclusions:The results showed that high acanthamoeba epidemic in pools water and ponds of squares is Sistan area can be risk factor for people, particularly children with inefficient immune system. Therefore, more attention of doctors to determine infection types and public authorities to train and prevent infection of water resources is recommended