اثر سينرژيستي ايندول تري كربينول با دوكسوروبيسين در افزايش القاي آپوپتوز بر رده سلولي لوسمي لنفوبلاستيك حاد (NALM-6)

Synergistic Apoptotic Effect Of Indole-3-Carbinol And Doxorubicin On Pre-B Acute Lymphoblastic Leukemia Cells

زمينه و هدف: ايندول تری كربينول( I3C ) كه در سبزيجات براسيكا يافت می‌شود خاصيت ضد سرطانی داشته و مكانيسم اصلی آن مهار فاكتور رونويسی هسته‌ای كاپا- B ( (NF- k B است. از سويی دوكسوروبيسين به عنوان يك داروی شيمی درمانی در كنار القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی، باعث فعال شدن NF- k B می‌شود. اين فاكتور رونويسی با القای بيان ژن‌های دخيل در بقای سلولی از آپوپتوز جلوگيری می‌كند و باعث كاهش نتايج درمان می‌شود. هدف از اين مطالعه تعيين اثر I3C در همراهی با دوكسوروبيسين بر افزايش آپوپتوز در سلول‌های لوسمی لنفوبلاستيك حاد (NALM-6) است. روش بررسی : در اين مطالعه بنيادی، رده سلولی لوسمی لنفوبلاستيك حاد، گونه پيش ساز لنفوسيت B با غلظت‌های مختلف I3C برای 1 ساعت تيمار شد و سپس با دوكسوروبيسين 125 نانو مولار به مدت 24 ساعت مجاور گرديد. بررسی محتوای DNA سلولی و رنگ آميزی Annexin V-FITC برای ارزيابی ميزان آپوپتوز انجام شد و با فلوسايتومتری مورد مطالعه قرار گرفت. بررسی داده‌ها با آزمون تی زوجی صورت گرفت. يافته‌ها : نتايج بررسی سيكل سلولی نشان داد I3C به صورت سينرژيستی در همراهی با دوكسوروبيسين باعث افزايش سلول‌ها در ناحيه‌ی sub-G1 يا ناحيه مربوط به سلول‌های آپوپتوتيك می‌شود. بررسی فلوسـايتومـتری رنگ آميزی Annexin V-FITC نيز نشان دهنده‌ی اثر I3C در افزايش سلول‌های آپوپتوتيك در همراهی با دوكسوروبيسين بود. نتيجه‌گيری: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد I3C به صورت سينرژيستی در همراهی با دوكسوروبيسين باعث افزايش القای آپوپتوز در سلولهای NALM-6 می‌شود.

Background and Aim: Indole-3-carbinol (I3C), found in Brassica species vegetables, exhibits antitumor effects. It has been shown that I3C induces apoptosis in various cell types through inactivation of the nuclear factor-kappa B (NF- k B) pathway. Anthracyclines such as doxorubicin, is widely used in the treatment of hematological malignancies, induce apoptosis in tumor cells via DNA damage and activation of p53. However, NF- k B pathway that activated by anthracyclines as a part of DNA damage response can induce chemo resistance. In this study the apoptotic effect of doxorubicin in combination with NF- k B inhibitor I3C was assessed in acute lymphoblastic leukemia cells. Materials and Methods: Human pre-B acute lymphoblastic leukemia cell line, NALM-6 cells, were preincubated with various concentrations of I3C for1 hour and then treated with 125nM doxorubicin at 37 ° C for 24 hours. Cellular DNA content assay and Annexin V-FITC staining were performed by flowcytometry for evaluation of apoptosis. Results: DNA histogram analysis of NALM-6 cells indicates that combination of I3C with doxorubicin synergistically escalated the percentages of sub-G1 population cells (apoptotic cells) as compared to doxorubicin-only treated group. Annexin V-FITC staining showed that cotreatment of NALM-6 cells with I3C and doxorubicin increased the proportion of Annexin-V positive cells (early apoptotic cells) in comparison with the doxorubicin treated cells. Conclusion: The results of cell culture treatments and cell death analysis by flowcytometry suggest that I3C synergistically potentiates doxorubicin-induced apoptosis in human leukemia NALM-6 cells.