اثر فرآيند كاهش لكوسيتي پيش از ذخيره بر سطوح بيان و ريزش رسپتور پيش‌ التهابي P-Selectin در فرآورده‌هاي پلاكت رندوم حاصله از PRP

The effect of pre-storage leukoreduction on the levels of expression and shedding of the pro-inflammatory molecule P-Sel in random PRP platelets

چكيده سابقه و هدف عملكرد پلاكت‌ها در زمان نگهداري، متاثر از آسيب‌هاي دوران نگهداري مي‌باشد كه در ميان شاخص‌هاي آن، بررسي تغييرات P-Selestin اهميت به سزايي دارد. لذا براي ارزيابي كارآيي فرآورده‌هاي پلاكتي، بيان و ريزش اين ماركر در پلاكت‌هاي فيلتر شده و عادي سنجيده شد. مواد و روش‌ها در يك مطالعه تجربي‌ ـ كاربردي، 10 كيسه كنسانتره پلاكتي از پايگاه تهران تهيه و 5 روز نگهداري شدند. نيمي تحت فيلتراسيون كاهش لكوسيتي قرار گرفتند. 5 كيسه خون كامل منبع تهيه پلاكت كنترل بودند. از فلوسايتومتري و الايزا، به ترتيب براي بيان و ريزش ماركر P-Selectin استفاده شد. براي تحليل داده‌ها، نرم‌افزار Graphpad و آزمون‌هاي Anova-one way و Mann-Whitney U test استفاده شد. يافته‌ها بيان P-Selectin فرآورده‌هاي فيلتر شده در روزهاي 1، 3 و 5 به ترتيب 8/1% ± 5/13% ، 2/1% ± 2/15% و 5/2% ± 4/27% بود كه در روز پنجم نسبت به سوم و اول افزايش معناداري داشت. در فرآورده‌هاي معمولي، بيان P-Selectin در روزهاي 1، 3 و 5 به ترتيب 7/1% ± 4/7%، 2% ± 21? و 2/2% ± 10? بود كه روز سوم نسبت به اول افزايش و پنجم نسبت به سوم كاهش معناداري داشت. اين كاهش مي‌تواند به دليل از دست رفتن رسپتورها حين ريزش و يا ميكروپارتيكولاسيون متعاقب فعاليت شديد پلاكتي باشد. بررسي ريزش رسپتوري نيز نشان داد ميزان P-Sel محلول فرآورده‌هاي فيلتري نسبت به غير فيلتر در روز سوم به صورت معناداري كمتر بود. نتيجه گيري مطالعه‌ها نشان داد با توجه به بيان و ريزش اين رسپتور، فيلتراسيون كاهش لكوسيتي مي‌تواند منجر به كاهش آسيب‌هاي دوران نگهداري باشد.

Abstract Background and Objectives During storage, functional activity of platelets is affected by platelet storage lesion (PSL). The over-expression of P-Selectin is one of the most important evidence of platelet activation, thereby monitoring P-Sel expression and shedding can be considered as an index for performance in platelet concentrates. Materials and Methods Ten PRP-platelet concentrates obtained from Tehran Regional Educational Blood Transfusion Center were subdivided into two groups of usual platelets and leuko-reduced platelets following pre-storage filtration. Flow-cytometery and ELISA were used to evaluate P-Sel expression and shedding, respectively. Data were analyzed by one way-Anova and Mann-Whitney U tests using Graphpad software. Results In filtered products, P-Sel expression on days 1, 3 and 5 after storage were 13.5 ± 1.8%, 15.2 ± 1.2% and 27.4 ± 2.5% , respectively. The results showed a sinificant increase of expression in day 5, compared to that in day 1 and 3. In non-filtered products, P-Sel expression on days 1, 3 and 5 were 7.4 ± 1.7%, 21 ± 2%, and 10 ± 2.2%, respectively. Increased expression in day 3 was followed by a significant decrease in day 5, that might be due to the loss of receptors via shedding and/or microparticulation during platelet post-activation. The levels of soluble P-Sel in filtered products were significantly less than unfiltered products in day 3. Conclusions Considering the expression and shedding of P-Sel, this study proposes that the leuko-reduction process favor less PSL effect during the storage of platelet products.