ارزيابي ژن actA در ليستريا مونوسيتوژنز جداسازي شده از لبنيات

Detection of actA gene in Listeria monocytogenes isolated from dairy products

سابقه و هدف: : ليستريا باكتري گرم مثبت و درون سلولي اختياري است. يكي از مهم ترين ژن هاي اين باكتري actA مي باشد كه موجب حركت باكتري در سلول ميزبان و در نتيجه بيماري زايي آن مي گردد. اين مطالعه با هدف ارزيابي حضور ژن actA در سويه هاي ليستريا مونوسيتوژنز جداسازي شده از فرآورده هاي لبني انجام شده است. مواد و روش ها: اين پژوهش به صورت مقطعي-توصيفي بر روي 70 نمونه جمع آوري شده از فرآورده هاي لبني مختلف در شهرهاي تهران و بابلسر از خرداد ماه 1391 تا مرداد ماه 1391 انجام شد. براي جداسازي گونه هاي ليستريا از محيط هايBHI آگار و مولر آگار استفاده گرديد. به منظور بررسي حضور ژن actA در گونه هاي ليسترياي جداسازي شده از روش PCR استفاده شد. همچنين براي تعيين ويژگي تهاجمي ليستريا مونوسيتوژنز از محيط TSA حاوي 0015/0% رنگ قرمز كنگو استفاده گرديد. يافته ها: در مجموع 10 مورد آلودگي با ليستريا مونوسيتوژنز، 4 مورد ليستريا اينوكوآ، 2 مورد ليستريا ولشيمري و 1 مورد ليستريا سليگري در نمونه هاي شير، پنير معمولي و پنير نرم شناسايي گرديد. همچنين در اين مطالعه در هيچ يك از نمونه هاي ماست و كره آلودگي ليستريايي مشاهده نگرديد. در تمامي نمونه هاي مورد بررسي فراواني ژن actA به صورت 100% مشاهده گرديد. تنها در نمونه هاي كنترل مربوط به سبزيجات حضور ژن 14% بود. از مجموع 10 مورد ليستريا مونوسيتوژنز جداسازي شده، 100% سويه هاي كلينيكي، 70% سويه هاي غذايي و 100% سويه هاي استاندارد خريداري شده از موسسه رازي داراي فنوتيپ قرمز كنگو مثبت بودند. نتيجه گيري: با توجه به نتايج به دست آمده در اين مطالعه پيشنهاد مي گردد كه بدون نياز به انجام كشت از روش PCR براي شناسايي ژن actA و نيز اثبات وجود ليستريا مونوسيتوژنز در انواع نمونه ها استفاده شود. همچنين به دليل مصرف گسترده لبنيات توسط جامعه، نظارت دقيق بر مراحل توليد، حمل و نقل و توزيع آن با هدف كاهش آلودگي باكتريايي ضروري به نظر مي رسد.

Listeria is a gram-positive facultative intracellular bacteria. The actA is one of the most important genes in this bacterium, which involves in bacterial movement in the host cell and so in its pathogenesis. The purpose of this study is to evaluate the actA gene in Listeria monocytogenes strains isolated from dairy products. Materials and Methods: This cross sectional study was performed on 70 samples of dairy products collected from Tehran and Babolsar, Iran from June to August 1391. The samples were grown onto BHI agar and Mueller agar. A PCR approach was used to detect the presence of the actA gene in the isolated Listeria species. Also, the isolated were grown into TSA containing 0.0015% Congo red in order to determine the invasive properties of L. monocytogenes. Results: This study showed contamination of the milk, cheese and soft cheese samples with L. monocytogenes (10 cases), L. innocua (4 cases), L. welshimeri (2 cases) and L. seeligeri (1 case). Furthermore, no yogurt and butter samples were contaminated with Listeria. Although all of these isolates contained actA gene in their genome, only 14% of the strains isolated from vegetables were positive for this gene. A total of 10 cases of isolated L. monocytogenes, 100% of the clinical strains, 70% of the strain food and 100% of standard strains purchased from Razi Institute were positive for Congo red phenotype. Conclusion: According to the results obtained in this study, detection of actA gene based on PCR can be used as an alternative approach for identification of pathogenic L. monocytogenes in samples without culture method. Also, due to the widespread use of dairy by individuals, it seems necessary to reduce bacterial contamination monitoring the production process, transport and distribute this material.