بررسي توزيع ژن‌هاي مولد بيوفيلم در سويه‌هاي استافيلوكوكوس اريوس جدا شده از شيرهاي خام عرضه‌شده در شهرستان سنندج

Distribution of genes encoding biofilm production in S. aureus isolated from raw milk in Kurdistan

استافيلوكوكوس اريوس يكي از عوامل اصلي بيماري ورم پستان گاوي مي‌باشد. اين باكتري گستره وسيعي از عفونت‌ها و بيماري‌هاي تهديدكننده زندگي را در انسان ايجاد مي‌نمايد. عوامل حدت مختلفي در بيماري‌زايي اين باكتري نقش دارند يكي از مهم‌ترين فاكتورهاي حدت استافيلوكوكوس اريوس قابليت تشكيل بيوفيلم مي‌باشد. اين باكتري قادر به توليد پلي‌ساكاريدها و فاكتورهاي پروتييني چسبيده به سطح است كه منجر به توليد بيوفيلم مي‌شود. در اين مطالعه به منظور بررسي ميزان آلودگي استافيلوكوكوس اريوس در شيرهاي خام، از 120 نمونه شير خام عرضه‌شده در سطح شهرستان سنندج نمونه‌برداري و با روش‌هاي متداول ميكروبيولوژي كشت‌داده شده و نتايج با استفاده از PCR مورد ارزيابي قرار گرفت. به منظور تشخيص تاييدي جدايه‌ها به عنوان استافيلوكوكوس اريوس با استفاده از PCR ژن اختصاصي nuc و براي شناسايي ژن‌هاي عامل توليدكننده بيوفيلم fnbA، clfaB، icaD و icaA از پرايمرهاي اختصاصي مربوط به هر ژن با استفاده از روش Multiplex PCR استفاده گرديد. با توجه به نتايج حاصل از كشت ميكروبي و تاييد آن با روش مولكولي، 49 جدايه بوسيله آزمايش‌هاي بيوشيميايي استاندارد و نيز تكثير ژن ترمونوكلياز اختصاصي گونه (nuc) به‌عنوان استافيلوكوكوس اريوس شناسايي شدند. بر اساس نتاييج حاصل از Multiplex PCR ژن‌هاي مولد بيوفيلم (38/69%)fnbA، (6/32%) clfaB، (77/38%) icaD و (18/59%) icaA در جدايه‌ها تشخيص داده شد. نتايج حاكي از آلودگي بالاي شيرخام عرضه‌شده در سطح شهرستان سنندج به استافيلوكوكوس اريوس و نيز قابليت بالاي جدايه‌ها در تشكيل بيوفيلم مي‌باشند.

Staphylococcus aureus is a major cause of bovine mastitis. Several virulence factors are involved in mastitis. One of the important virulence factors is the ability of the bacterium to produce biofilms. These bacteria are capable of producing polysaccharides and proteinaceous substances attached to the surfaces, leads to biofilm formation. In this study, a total of 120 raw milk samples was obtained from Kurdistan province and analyzed for the presence of S. aureus. The presence of S. aureus was assessed by conventional culture method and confirmed by PCR assay. For this, nuc gene was exploited as the specific target sequence to detect S. aureus. Moreover, Multiplex PCR was used to identify the presence of clfaB, fnbA, icaD and icaA genes which encode biofilm formation. Based on results, S. aureus was found in 49 (40.83%) of the samples. The frequency of each of the genes was determined as 69.38%, 32.6%, 38.77%, and 59.18 for fnbA, clfaB, icaD and icaA, respectively. Results revealed a high contamination rate of raw milks with S. aureus, and the ability of the isolates to form biofilms.