بررسي رشد و تكثير سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از پالپ دندان بر روي غشاي نانو متخلخل PLLA

Evaluation of Proliferation and Development of Mesenchymal Stem Cell on Nanoporous PLLA Membrane Scaffold

مقدمه: داربست بافتی دارای وظايف و اعمال مشابه ماتريكس خارج سلولی بوده و جزء مهمی در تكنيك‌های مهندسی بافت محسوب می‌گردد. PLLA يكی از داربست‌هايی است كه در اين زمينه استفاده می‌شود. PLLA در اين مطالعه به صورت غشای نانو متخلخل می‌باشد. هدف از اين مطالعه بررسی زيست سازگاری و تاثير غشای نانو متخلخل PLLA بر روی تكثير سلول‌های بنيادی مزانشيمی می‌باشد. روش ‌بررسی: غشای نانو متخلخل PLLA به‌ وسيله فرايند جدايی فازی تهيه شد و برای شناسايی نوع پليمرهای بكار رفته در ساختمان آن از آزمون FTIR استفاده شد. سپس سلول‌های مزانشيمی پالپ دندان بر روی نانو غشاء و همزمان در محيط عاری از نانو غشاء كشت داده شد. اندازه‌گيری حيات و تكثير سلول‌ها پس از چسبيدن سلول‌ها به كف پليت در يك دوره دو هفته‌ای با استفاده از آزمون MTT در روزهای پنجم، هفتم و نهم و همچنين اولترا استراكچر و ميزان چسبندگی سلول‌های مزانشيمی بر روی اين غشاء با استفاده از ميكرسكوپ الكترونی(SEM) مورد ارزيابی قرار گرفت. نتايج: توانايی زيست سازگاری غشای نانو مناسب بوده و سلول‌ها به خوبی به سطح غشاء چسبيده‌اند. قابليت حيات سلول‌های مزانشيمی در گروه نانو مثبت به‌طور معنی‌داری(001/0p<) از گروه نانو منفی بيشتر بود. بيشترين تأثيرگذاری نانو غشاء بر ميزان حيات سلولی در روز نهم و كمترين تأثيرگذاری در روز پنجم مشاهده‌شد. نتيجه‌گيری: نانو غشای PLLA به علت زيست‌ تخريب ‌پذير بودن و عدم سميت‌زايی، ميزان چسبندگی و نيز تكثير سلول‌های بنيادی مزانشيمی را افزايش می دهد و با گذشت زمان اين فرايند تشديد می‌شود.

Introduction: Scaffold has therole of the extracellular matrix in regulating cell survival and it is an important component in tissue engineering techniques. One of the scaffolds that was used in this field, was PLLA (poly L-lactic acid) which was usually prepared by electro spinning method. The purpose of this study was to evaluate the biocompatibility of nano-porous PLLA membrane on proliferation of mesenchymal stem cells. Method: PLLA nano-porous membranes were prepared by phase separation process. To identify the type of polymer used in its construction, FTIR analysis was performed. Then, dental pulp mesenchymal cells were cultured on a nano-membrane and nano-membrane-free environments ,simultaneously. After attachment of the cells on the bottom of the plate, the biocompatibility and cell proliferation was assessed in a two-week period using MTT test on the fifth, seventh and ninth days of cell culture. The ultra-structure and adhesion of mesenchymal cells on the membrane were evaluated using scaning electron microscopy(SEM). Result: Nano Membrane potential had good biocompatibility and the cells had penetrated into the surface membranes properly. The viability of mesenchymal cells cultured on nano-membranes were significantly higher than the control group. The highest effect of nano-membrane on cell viability was seen on the ninth day and the lowest effect was seen on the fifth day. Conclusion: Due to the biodegradable and non-toxic properties of nano PLLA membrane, it could increase the adhesion and proliferation of mesenchymal stem cells and these effects will exacerbated over time.