مطالعه واكنش پروتيين A هم جوش با پروتيين متصل شونده به مالتوز (MBP-Protein A) با ايمونوگلوبولين برخي گونه هاي حيواني

Study on the reaction of maltose binding protein-protein A (MBP-Protein A) fusion protein with the immunoglobulin of some animal species

پروتيين A استافيلوكوكوس اوريوس كه در ديواره سلولي اين باكتري قرار دارد، متعلق به گروهي از پروتيين هاي باكتريايي با ويژگي اتصال به ملكول IgG ميباشد. اخيراً ما با موفقيت پروتيين A را به صورت هم جوش با پروتيين متصل شونده به مالتوز (MBP-Protein A) در E.coli بيان نموده، سپس آن را با پراكسيداز نشان دار كرديم. هدف از مطالعه حاضر ارزيابي واكنش اين پروتيين A نوتركيب با ايمونوگلوبولين هاي برخي گونه هاي حيواني است. بر اساس آزمايش هاي اليزا يا ايمونودات، پروتيين A نشان دار به خوبي قادر به شناسايي IgG گربه و سگ بود. واكنش اين پروتيين با IgG گاو و اسب ضعيف و با IgG گوسفند بسيار ضعيف بود. اين پروتيين هيچ واكنشي با IgG مرغ نداشت. در اين تحقيق همچنين قابليت استفاده از پروتيين A در اليزاي غيرمستقيم براي جستجوي پادتن ضد E.coli در سرم گربه و سگ نشان داده شد. بنابراين، اين پروتيين نوتركيب از نظر بيولوژيكي فعال است و ميتواند حداقل براي برخي گونه هاي حيواني در آزمايش هاي ايمني شناسي استفاده گردد.

Staphylococcus aureus protein A, as a cell wall protein of the bacterium, belongs to a group of bacterial proteins with binding specificity for the IgG molecule. Recently, we cloned and expressed the protein A gene of Staphylococcus aureus in E.coli, as a fusion protein with maltose binding protein (MBP-Protein A). After purification, the expressed protein was also labeled with peroxidase. The aim of this study was to evaluate the reaction of this recombinant protein A with the immunoglobulin of some animal species. Based on the results of ELISA and immunodot, the labeled protein A was able to bind cat and dog IgGs. The reactivity of the protein with cattle and horse IgGs was weak and it reacted poorly with sheep IgG. This protein did not react with chicken IgG. In this study, the ability of the expressed protein A labeled with peroxidase, for detection of E.coli specific antibodies in cat and dog sera was demonstrated by indirect ELISA. In conclusion, the recombinant MBP-protein A is biologically active and could be used in immunological assays at least for certain animal species.