آثار آسيب ناشي از ايسكمي پرفيوژن مجدد روي بيان ژني برخي از ايزوفرم‌هاي سيتوكروم P450 در كبد موش صحرايي

Effects of ischemia-reperfusion injury on the gene expression of some cytochrome P450 isoforms in the rat liver

آسيب ناشي از ايسكمي پرفيوژن مجدد ممكن است سبب تغييرهاي عمده در عملكرد كبد شود. كبد، عضو مهمي براي سوخت و ساز بسياري از تركيب ها و داروهاست كه در آن آنزيم‌هاي سيتوكروم P450 نقشي اساسي ايفا مي‌كنند. در مطالعه حاضر به منظور بررسي آثار ناشي از ايسكمي پرفيوژن مجدد روي بيان ژني برخي از ايزوفرم هاي سيتوكروم P450 ، چهار گروه 5تايي موش صحرايي در معرض يك ساعت ايسكمي لوبار و سپس به ترتيب به مدت 1، 6، 12 و 24 ساعت تحت پرفيوژن مجدد قرار گرفتند و يك گروه شاهد جراحي هم به عنوان كنترل انتخاب شد. در انتهاي زمان‌هاي پرفيوژن مجدد، نمونه‌ خون براي اندازه‌گيري تغييرهاي آنزيمي، جمع‌آوري و سپس حيوانات به روش مرگ با ترحم كشته شدند و نمونه‌هاي بافت كبد براي مطالعه بيان ژني اخذ گرديدند. از نمونه‌هاي بافتي، RNA تام استخراج گرديد و cDNA از مدل mRNA ساخته شد. ميزان بيان mRNA با استفاده از real time PCR و پرايمرهاي اختصاصي ايزوفرم هاي سيتوكروم P450 محاسبه گرديد. نتايج، نشان داد كه ميزان آلانين آمينوترانسفراز، آسپارتات آمينوترانسفراز و آلكالين فسفاتاز در تمام گروه‌هاي در معرض ايسكمي پرفيوژن مجدد به طور معني‌دار (05/0P < ) افزايش يافت كه حداكثر آن در ? ساعت بعد از شروع پرفيوژن مجدد بود؛ اما مقادير mRNA ايزوفرم هاي CYP2E1، CYP3A1 و CYP1A1 در گروه‌هاي در معرض ?، ?? و ?? ساعت بعد از پرفيوژن مجدد به طور معني‌داري (05/0P < ) كاهش نشان داد. نتايج اين پژوهش، نشان داد كه آسيب ناشي از ايسكمي پرفيوژن مجدد كبد، ممكن است سبب كاهش بيان ژني ايزوفرم هاي سيستم سيتوكروم P450 شود كه ممكن است فعاليت‌هاي سوخت و ساز كبد را متاثر سازد.

Hepatic ischemia-reperfusion (IR) injury may affect different biological and functional roles of the liver. Liver accounts as an important organ for metabolizing different compounds and drugs in which cytochrome P450s (CYPs), play an important role. This study aimed to investigate the effects of IR injury on the gene expression of the major CYPs isoforms in the rat liver. Four groups (n=5) of male Sprague-Dawley rats underwent 60 min lobar hepatic ischemia followed by 1, 6, 12 or 24h reperfusion, and a sham-operated group was selected as control. At the end of each reperfusion period, blood samples were taken to evaluate enzyme alterations induced by IR and then animals were euthanatized and tissue samples were taken to study IR-induced changes in gene expression of some CYPs isoforms. Total RNA was isolated from the rat liver tissue and then cDNA was synthesized from an mRNA template. The level of mRNA expression in the liver was analyzed by real-time PCR using specific primers for CYP450 isoforms. The levels of ALT, AST and ALP in the groups subjected to IR was significantly (P < 0.05) increased during different times of reperfusion and reached to the peak 6h after the reperfusion. However, the level of CYP1A1, CYP3A1 and CYP2E1 mRNA was significantly (P < 0.05) decreased during 6, 12 and 24h of reperfusion. These results showed that IR injury may induce down regulation of the individual CYP450 isoforms and these changes may affect CYP-mediated drug metabolizing activities by the liver.