تعيين هويت مولكولي ايزوله‌هاي اورنيتو باكتريوم جدا شده از مرغداري هاي استان مركزي

Molecular identification of Ornithobacterium isolates from poultry in Markazi Province

سابقه و هدف: اورنيتوباكتريوزيز يك بيماري عفوني در گونه‌هاي پرندگان است كه تقريبا در تمام كشورها در سراسر جهان گزارش شده است. اولين ايزوله‌هاي ثبت شده ORT از بوقلمون در آلمان در سال 1981 بود.ORT همچنين از مرغ، مرغ شاخدار، غازها، مرغابي‌ها، بلدرچين، كبوتر، قرقاول، كبك، شترمرغ، مرغ ماهي‌خوار، كلاغها و بوقلمون جدا شده است. در ايران عفونت ORT براي اولين بار توسط بناني و همكارانش گزارش شد. هدف اصلي اين مطالعه شناسايي اورنيتوباكتريوم‌هاي جدا شده در استان مركزي با استفاده از تجزيه و تحليل مولكولي است. مواد و روش‌ها: 15 ايزوله كه با روشهاي بيوشيميايي توسط موسسه تحقيقات واكسن و سرم سازي رازي از مرداد 90 تا پايان سال 91 واز بين نمونه‌هايي كه به صورت تصادفي از 20 مرغداري مناطق مختلف استان مركزي و از 231 قطعه طيور جمع آوري شده بود مورد آزمايش قرار گرفت. ايزوله ها در محيط آگار خوندار حاوي 5µg/ml جنتامايسين كشت و به مدت 48 ساعت در c?37 انكوبه شد. سپس همه نمونه‌ها با استفاده از پرايمر16S rRNA ،PCR و در نهايت توالي يابي شدند. يافته‌ها: نتايج آزمون PCRو مشاهده باند 784 bp بر روي ژل آگاروز وجود جنس باكتري اورنيتوباكتريوم را از 15 نمونه تاييد كرد. همچنين مقايسه تواليهاي بدست آمده از ايزوله‌هاي جدا شده با توالي‌هاي موجود در GenBankنشان داد كه 98 -100 درصد شباهت با سويه‌هاي اورنيتوباكتريوم رينوتراكيال وجود دارد كه مبين وجود اين گونه‌ي باكتري در مرغداريهاي استان مركزي است. نتيجه گيري: باكتري اورنيتوباكتريوم رينوتراكيال مي تواند گونه غالب باكتري اورنيتوباكتريوم در مرغداريهاي استان مركزي باشد.

Aim and Background Ornithobacteriosis is an infectious disease of avian species reported in almost all countries around the world. The first recorded isolation of ORT was made from turkeys in Germany in 1981. ORT has been isolated from chickens, ducks, geese, guinea fowls, gulls, ostriches, partridges, pheasants, pigeons, quails, rooks and turkeys so far. In Iran, ORT infection was reported by Banani et al for the first time. The aim of the study was to identify the Ornithobacterium isolated in Markazi province using molecular analyses. Materials and Methods: Sampling and biochemical isolation has been performed in Razi vaccine and serum research institute. Random sample of 20 units and 231 birds has been collected from the Arak poultry farms during August 2011 to March 2013. All of the fifteen isolated samples were cultured in blood agar media with 5µg/ml Gentamicin and incubated at 48 hours in 37?C. Then all samples were subjected to PCR and sequencing for 16S rRNA. Results: PCR results and observations 784 bp band on the agarose gel confirmed the existence of genera Ornithobacterium. Also compared sequences obtained from isolated sequences available in GeneBank showed that 98-100% were similar to Ornithobacterium rhinotracheale strain indicating the existence of these bacterial species in the farms of Markazi province. Conclusion: Ornithobacterium rhinotracheale can be a dominant species from Ornithobacterium in the farms of Markazi province.