بررسي خواص بيولوژيكي تركيب نشاندار:Herceptin 99mTc -DTPA- در سلولهاي سرطاني

The biological properties evaluation of the radiolabeled complex: 99mTc -DTPA- Herceptin in cancerous cell lines

سابقه و هدف: هرسپتين يك آنتي بادي مونوكلونال انساني، عليه آنتي ژن HER2 است كه براي درمان سرطان هاي پستان در مراحل ابتدايي كه بيان كننده آنتي ژن HER2هستند، مورد استفاده قرار ميگيرد. هرسپتين، پتانسيل استفاده به عنوان داروي راديوايمونوسنتي گرافي در تشخيص سرطان هاي بيان كننده HER2را دارد. در اين تحقيق نشاندارسازي آنتي بادي هرسپتين با تكنسيم، به عنوان اولين قدم در توليد يك راديوداروي جديد تشخيصي، مورد ارزيابي قرار گرفت. مواد و روش ها: نشاندارسازي با شلاتور DTPA: Diethylene Triamine Pentaacetic Acid انجام گرفت كليه تست هاي كنترل كيفي شامل بازده نشاندارسازي، پايداري در بافر و سرم، ايمونوراكتيويته و پايداري در بدن موش سالم براي آن انجام شد. يافته ها: بازده نشاندارسازي2±97%، پايداري در بافر 1±96% و سرم 2±90 % بعد از 24 ساعت و ايمونوراكتيويته 3±83% محاسبه شد. ميزان اتصال هرسپتين نشاندار به سطح سلول هاي SKBR3،MCF7 و A431 با افزايش بيان آنتي ژن HER2 افزايش مي يابد. نتيجه گيري: يافته ها نشان دادند كه تركيب نشاندار 99mTc -DTPA- Herceptin احتمالا مي تواند يك كانديداي اميدواركننده براي كاربردهاي تشخيصي در طيف وسيعي از سرطان هاي بيان كننده آنتي ژنHER2 بكار برده شود كه نياز به مطالعات تكميلي در آينده دارد.

Aim and Background: Herceptin as a humanized monoclonal antibody against HER2 is used for the treatment of the early stage of HER2 over-expresed breast cancers. This antibody has the potential to be used as radioimmuno-scintigraphy agent in diagnosing HER2 breast cancer. In this study, the radiolabeling of Herceptin with 99mTc was evaluated for the first step in producing a new radiopharmaceutical agent. Materials and Methods: Herceptin antibody was labeled with Technetium-99m using Diethylene Triamine Pentaacetic Acid (DTPA) as chelator. All the quality control tests were performed. Labeling efficiency, stability in buffer and serum, immunoreactivity, toxicity and cell binding of the complex were tested on different breast cancer cell lines. Results: The labeling efficiency of the complex was 97 ± 2%. The stabilities in phosphate buffer and in human blood serum within 24 h post preparation were 96 ± 1% and 90 ± 2%, respectively. The immunoreactivity of the complex was 83 ± 3%. The binding of labeled antibody to the surface of SKBR3, MCF7 and A431 cells were increased by increasing Her2 concentration on the cells surface. No cytotoxicity effect of complex was seen on the cell lines. Conclusion: The findings showed that 99mTc-DTPA-Herceptin can be a promising candidate as HER2 antigen scanning for human breast cancer that needs more investigations in future.