بررسي بيان ژن P53 در بيماران مبتلا به سرطان مري با استفاده از روش

P53 gene expression evaluation in patients with esophageal cancer using reverse transcriptase real time polymerase chain reaction

چكيده سابقه و هدف: سرطان مري، ششمين عامل مرگ ناشي از سرطان در جهان است. شيوع سرطان مري در ايران بسيار بالاست. P53 يكي از شناخته‌شده‌ترين ژن‌هاي بازدارنده‌ي تومور است كه در برابر آسيب‌هاي وارده به DNA فعال مي‌شود و هدف مهمي براي تحقيقات شناخته مي‌شود. به دليل اينكه تاكنون هيچ تحقيق و پژوهشي در مورد ژن P53 در بيماران مبتلا به سرطان مري با تكنيك Real-time PCR در ايران انجام نگرفته است، ضرورت انجام اين تحقيق با روش ذكر شده به شدت احساس مي‌گردد. اين تحقيق به روش Historical cohort study انجام گرفت. مواد و روش‌ها: اين تحقيق از مهرماه سال 1392 تا خرداد 1393در پژوهشكده زيست فناوري دانشگاه زابل انجام گرديد. در اين پژوهش، بيان ژن P53 كه يكي از فاكتورهاي مهم ايجاد سرطان مري است، در بيماران مبتلا به سرطان مري در ايران مورد مطالعه قرار گرفت. 15 نمونه بافت پارافينه سرطان مري و 15 نمونه پارافينه سالم جمع‌آوري شده از مراكز مختلف پزشكي درماني (زابل، زاهدان، كاشان) جهت اندازه‌گيري بيان ژن P53 توسط روش Reverse transcriptase real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR) آنـاليـز گـرديـد. تمامي واكنش‌هاي PCR با سه تكرار براي ژن P53 و كنترل داخلي (B-actin) توسط متد (Livac) 2-??CT انجام شد. بيان ژن P53 در دو گروه بيمار و سالم با آزمون t-test مورد قضاوت قرار گرفت. يافته‌ها: تحقيق در دو گروه 15 نفره انجام گرفت. اختلاف نسبتاً زيادي بين افراد بيمار و سالم در بيان ژن P53 وجود داشت. به‌طوري‌كه بيان ژن P53 در افراد بيمار، 12 برابر بيشتر از افراد سالم بود (05/0P < ). به نظر مي‌رسد كه افزايش بيان ژن P53 احتمالاً مي‌تواند به عنوان بيوماركر در سرطان مري باشد. نتيجه‌گيري: بيان ژن P53 در مبتلايان به سرطان مري به مراتب بيشتر از افراد سالم بود. Abstract: Background and Aim: Esophageal cancer is the second leading cause of cancer death in the world. The incidence of esophageal cancer is very high in Iran. The incidence of high mutations in the P53 in both cancers of the esophagus (esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and adenocarcinoma of the esophagus (EAC) has been reported. P53 is one of the most well-known tumor suppressor genes that in half of all human tumors have mutated. The P53 protein to be activated against damaged DNA. Therefore, as an important target for investigation in cancer research. Nevertheless, to our knowledge, this is the first study of P53 gene expression evaluation in patients with esophageal cancer using reverse transcriptase real time polymerase chain reaction in Iran. This study was conducted as a historical cohort study. Materials and Methods: At the present study, the P53 gene expression in patients with esophageal cancer was studied in Iran. Fifteen paraffin-embedded tissue samples from esophageal cancer and 15 healthy collected from medical treatment centers (Zabol, Zahedan and Kashan) were used to measure the expression of the P53 gene by using RT-qPCR. RT-qPCR reactions were performed with three repetitions for the P53 gene and internal control (B-actin) using 2-??CT (Livac) method for all samples. P53 gene expression in two groups of patients and controls were analyzed by t-test. Results: The results indicated high significant difference in P53 gene expression between patients and controls (p < 0.05). P53 gene expression in patients was 12 times more than healthy group (p < 0.05). ‍Conclusion: It seems that the P53 gene expression is likely to be used as a biomarker in esophageal cancer.