عنوان مقاله :
طراحي و بيان آنتي‌ژن نوتركيب HER-2 بهعنوان نشانگر تشخيصي سرطان سينه
عنوان فرعي :
Design and Expression of Recombinant HER-2 Antigen as a Marker for Detection of Breast Cancer
پديد آورندگان :
كاظمي، مرجانه نويسنده M.Sc. Student, Department of Biology, Islamic Azad University of Damghan, Damghan, Iran Kazemi, Marjane , اماني، جعفر نويسنده 2) دانشگاه علوم پزشكي بقيه الله (عج) ، مركز تحقيقات ميكروبيولوژي كاربردي ، تهران ، ايران. -, - , سلمانيان، علي هاتف نويسنده Associated Professor, Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran Salmanian, Ali Hatef , فرقاني فرد، محمد مهدي نويسنده Assistant Professor, Department of Biology, Islamic Azad University of Damghan, Damghan, Iran Forghanifard, Mohammad Mahdi , مولايي، حسين آقا نويسنده Ph.D. Candidate, Applied Biotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran Aghamollaei, Hossein
اطلاعات موجودي :
فصلنامه سال 1393 شماره 0
كليدواژه :
كلون و بيان ژن , Recombinant protein expression , ژن her-2 , her-2 Gene , توليد نوتركيب پروتيين , سرطان سينه , breast cancer , Cloning and gene expression
چكيده فارسي :
هدف: سرطان سينه با شيوع حدوداً يك ميليوني يكي از معمول‌ترين سرطان‌ها در ميان زنان سراسر جهان است و هفت درصد مرگ و ميرهاي ناشي از سرطان را شامل مي‌شود. راهبردهاي ايمني‌زايي و شناسايي زود هنگام متعددي با استفاده از آنتي‌ژن‌هاي سطحي سرطان سينه هم‌اكنون به‌صورت باليني توسعه يافته است. در واقع سرطان سينه در اثر افزايش بيان بيش از حد يك سري از ژن‌ها ايجاد مي‌شود. HER-2 بهعنوان گيرنده تيروزين كينازي در خانواده گيرنده‌هاي عامل رشد اپيدرمي قرار دارد. نقش-2 HER در سرطان سينه به‌طور گسترده مطالعه شده است. HER-2 تنها در 25-30 درصد از بيماران مبتلا به سرطان سينه شايع بوده و هدف درماني HER-2 با آنتي‌بادي‌هاي انساني مثل هرسپتين ثابت شده است. هدف از اين تحقيق توليد پروتيين نوتركيب HER-2 به‌منظور تشخيص زود هنگام سرطان سينه است.
مواد و روش‌ها: بخشي از ژن her-2 با طراحي آغازگر مناسب به‌وسيله PCR تكثير شده و سپس درون ناقل پلاسميدي pET28a براي بيان كلون شد، پس از تاييد فرآيند كلونينگ با روش‌هاي هضم آنزيمي و تعيين توالي، بيان اين ژن در باكتري اشريشيا كلي با استفاده از IPTG القا و سپس پروتيين مورد نظر توسط ژل SDS-PAGE بررسي شد.
نتيجه‌گيري: بخشي از ژن her-2 انساني به‌صورت نوتركيب در باكتري اشريشيا كلي بيان شد كه مي‌تواند يك عامل تشخيصي مناسب براي سرطان سينه باشد.
چكيده لاتين :
Objective: The incidence of breast cancer is approximately one million which makes this cancer one of the most common among women worldwide. Breast cancer comprises 7% of the total death rate caused by cancers. Several strategies that use tumor-associated antigen (TAA) vaccination and early detection of breast cancer are clinically being developed. Breast cancer is caused by increased over expression of certain genes. HER-2 is a tyrosine kinase receptor in the epidermal growth factor family. The role of HER-2 in breast cancer has been extensively studied. HER-2 is found in 25%-30% of breast cancer patients. Herceptin, a human antibody, is used as a therapeutic target for HER-2. The purpose of this study is to produce recombinant protein HER-2 for early detection of breast cancer cells.
Methods: We used specific primers to amplify the HER-2 gene. The amplified gene was cloned into pET28a as an expression vector. Cloning was confirmed by restriction analysis and sequencing. Expression was induced using IPTG and the recombinant protein was analyzed by SDS-PAGE.
Results: Cloning of the HER-2 gene was confirmed by enzyme digestion and sequencing. The gene was expressed in E.coli BL21 DE3. The pET-28a vector which contained the HER-2 gene showed a high level of expression. The recombinant protein was confirmed by Western blot analysis.
Conclusions: A portion of the HER-2 gene was expressed as a recombinant in E.coli. This could be a good diagnostic test for breast cancer
عنوان نشريه :
پژوهش هاي آسيب شناسي زيستي
عنوان نشريه :
پژوهش هاي آسيب شناسي زيستي
اطلاعات موجودي :
فصلنامه با شماره پیاپی 0 سال 1393
كلمات كليدي :
#تست#آزمون###امتحان
