بهينه‎سازي توليد كالوس و باززايي در گياه Salsola arbuscula pall.

Optimization of Callus Production and Plant Regeneration in Salsola arbuscula pall.

هدف: توليد گياه از طريق كشت بافت از نظر مهندسي ژنتيك اهميت زيادي دارد لذا در اين تحقيق بهينه‎سازي شرايط كشت به‎منظور توليد كالوس و باززايي گياه Salsola arbuscula بررسي گرديد. مواد و روش‎ها: ابتدا بذر گياه در محيط كشت MS كشت گرديد و پس از دو ماه، جداكشت‎هاي ريشه، ساقه و برگ گياهان توليد شده جهت توليد كالوس در محيط كشت MS حاوي غلظت‎هاي مختلف از هورمون‎هاي 2و4-دي كلرو فنوكسي استيك اسيد (2,4-D) و كينتين (Kin) كشت گرديدند. باززايي گياه نيز در محيط كشت‎هاي مختلف بررسي شد. نتايج: بررسي‎ها نشان داد كه بهترين جداكشت در القا توليد كالوس، جداكشت ريشه و مناسب‎ترين محيط كشت mg/L) 1) mg/L) + Kin 1) MS + 2,4-D بود. همچنين در محيط mg/L Kin 5/0MS + وmg/L Kin 1MS + از ساقه باززايي مستقيم صورت گرفت. نتيجه‎گيري: با وجود توليد كالوس در محيط كشت حاوي فقط هورمون 2,4-D، تركيب دو هورمون اكسين و سيتوكينين باعث افزايش قابل توجهي در ميزان توليد كالوس گرديد. باززايي مستقيم نيز فقط در محيط كشت فاقد اكسين رخ داد. بنابراين ميزان توليد كالوس و باززايي به ميزان تنظيم‎كننده‎هاي رشد خارجي وابسته است و ميزان تنظيم كننده‏هاي رشد خارجي نيز به‏شدت به ژنوتيپ و مقدار هورمون داخلي گياه بستگي دارد.

Aim: Plant production from tissue culture is of high importance from genetic engineering point of view, so in this study, optimization of tissue culture conditions for callus production and plant regeneration of Salsola arbuscula were examined. Material and Methods: Seeds were planted MS medium and after two months, roots, stems (internodes) and leaves explants were transferred to the MS medium with different concentration of 2,4-D and Kinetin hormones for production callus. Plant regeneration was also examined on the various media. Results: Results showed that the best medium to induce callus production were medium of MS + 2,4-D (1 mg/L) + Kin(1 mg/L) and the best explants were roots. So, direct shoot regeneration produced in the medium MS + Kin(1 mg/l) and MS + Kin (0.5 mg/L). Conclusion: Despite production of callus on medium containing only 2,4-D, combined two hormones, auxin and cytokinin, increased the rate of callus production. Also direct shoot regeneration has occurred in medium without auxin. So, production rate of callus and plant regeneration are dependent on amount of external plant growth regulators, and also, amount of external plant growth regulators significantly dependent to genotype and amount of internal plant hormones. Keywords: Callus, 2,4-D, Kin, Regeneration, Salsola arbuscula