القا تمايز و مرگ سلولي مشتقي از خانواده ي 4-آريل- 4-H كرومن ها بر روي NB4، لوسمي پروميلوسيت حاد انسان

Induction of Differentiation and Cell Death of the Derivative of 4-aryl-4H-Chromenes Family on NB4 Human Promyelocytic Leukemia Cell Line

هدف: در اين مطالعه تاثير يكي از مشتقات خانواده كرومن‎ها (3-BMPC) در القا تمايز و آپوپتوزيس در سلول‎هاي لوسمي NB4 به عنوان مدل لوسمي پروميلوسيتي حاد (Acute promyelocytic leukemia: APL) بررسي شده است. مواد و روش‎ها: اثر سمي (cytotoxic) 3-BMPC بر روي سلول‎هاي لوسميك NB4 از طريق شمارش سلولي به‎وسيله هموسايتومتر بررسي شد و زنده بودن سلول با استفاده از آزمون دفع رنگ تريپان بلو مورد مطالعه قرار گرفت. جهت بررسي تمايز از رنگ‎آميزي رايت گيمسا و فعاليت فاگوسيتوز (بيگانه خواري) سلول‎هاي تمايز يافته و براي بررسي آپوپتوزيس از رنگ‎آميزي سلول‎ها با هوخست 33258 و مشاهده با ميكروسكوپ فلورسنس و آزمون قطعه قطعه شدن DNA استفاده گرديد. نتايج: رده سلولي لوسمي NB4 انساني پس از كشت، تحت تاثير دارو در غلظت‎هاي مشخص (1تا 12 نانومولار) و فاصله‎هاي زماني مختلف (24 تا 72 ساعت) قرار گرفت. مطالعه حاضر نشان داد كه اين تركيب سبب مهار رشد وابسته به زمان و غلظت مي گردد. IC50 اين تركيب بعد از 72 ساعت 3 نانومولار محاسبه گرديد. نتايج نشان داد كه بعد از 48 ساعت از تيمار سلول‎ها با غلظت‎هاي پايين (3 نانو مولار) از 3-BMPC، سلول‎هاي NB4 به سمت ماكروفاژ/ مونوسيت تمايز يافتند. نتايج حاصل از رنگ آميزي سلول‎ها با هوخست 33258 نيز نشان داد كه بعد از 72 ساعت از تيمار سلول‎ها با غلظت IC50 تركيب، آپوپتوزيس در سلولها القا شد. نتيجه گيري: با توجه به اثر اين تركيب در القاي تمايز و آپوپتوزيس، اين تركيب مي‎تواند در كنار ساير تركيبات دارويي به عنوان كانديداي مناسبي براي درمان سرطان خون معرفي شود.

Aim: Chromene derivatives are able to growth inhibition and induce apoptosis in different cell types. In this study, we reported a derivative of 4-aryl-4H-chromenes with differentiation and apoptotic activity against NB4, Acute Promyelocytic Leukemia (APL) cell. Matherial and Methods: The cells were seeded in 24-well plates at 1×105 cells/well and treated with 1?12 nM of the 2-amino- 4-(3-bromo 4, 5 dimethoxy – phenyl) -3- cyano -7-(dimethylamino) -4H-chromene (3-BMPC). This compound inhibited growth and viability of the cells in dose- and time-dependent manner. 3-BMPC was found to be highly active growth inhibitor with IC50 of 3 nM (72 h) as determined by trypan blue exclusion test. Wright-Giemsa staining and latex particle phagocytosis assay were used to study differentiated cells. Apoptosis was also detected by fluorescent microscope and DNA fragmentation assay. Results: Results indicated that at low concentrations (3 nM) and after 48 h of treatment, NB4 cells were differentiated to monocyte/macrophage lineage. Results of Hoechst 33258 staining also revealed that the compound induced apoptosis at respective IC50 value after 72 h of treatment. Conclusion: Regarding these results, this compound can be proposed as effective agents for more investigation in leukemia treatment. Key words: Acute Promyelocytic Leukemia, Apoptosis, 4-aryl-4H-chromenes, Differentiation, NB4 cell