بررسي مقايسه‏اي ويژگي‏ها و توانايي تمايز سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي مشتق شده از مغز استخوان، بافت چربي و مايع آمنيوتيك به سلول‏هاي فيبر عدسي چشم

Characterization and Lens Fiber like Cells Differentiation of Mesenchymal Stem Cells from Bone Marrow, Adipose Tissue and Amniotic Fluid: A Comparative Study

هدف: در اين مطالعه، اثر تمايزي مايع زجاجيه بر سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي مشتق شده از مغز استخوان، بافت چربي و مايع آمنيوتيك به سلول‏هاي شبه فيبر عدسي چشم مورد بررسي قرار گرفته است . موادو روش‏ها: در اين كار تجربي سلول‏هاي بنيادي از مغز استخوان ران و چربي از ناحيه كشاله ران موش هاي بالغ NMRI و مايع آمنيوتيك از جنين‏هاي 13 روزه موش‏هاي NMRI جدا شده و كشت داده شد. مزانشيمي بودن سلول‏ها با ماركرهاي سطحيCD31 وCD90 به روش فلوسيتومتري بررسي شد. سپس سلول‏ها تحت القاي زجاجيه چشم گاو به ‏مدت ?4 روز با درصدهاي مختلف 10، 30،20،15 ، 40 و 50 قرار گرفتند. بيان ماركرهاي آلفا كريستالين در نمونه هاي تجربي و كنترل با روش ايمونوسيتوشيمي مورد بررسي قرار گرفت . نتايج: آناليز فلوسايتومتري ماركرهاي سطحي نشان داد كه سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان و مايع آمنيوتيك و بافت چربي ماركر CD90را (به‏ترتيب 29/29 درصد، 57/0 درصد،82 درصد) بيان مي‏كنند. به‏علاوه سلول بنيادي مزانشيمي از هر سه منبع ماركر CD31 (به‏ترتيب 44/3 درصد، 53/1 درصد، 1/0 درصد) بيان مي‏كنند. بررسي‏هاي ايمونوسيتوشيمي نشان داد كه غلظت4? درصد از مايع زجاجيه بر روي سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي بافت چربي و مايع آمنيوتيك و غلظت 15 درصد از مايع زجاجيه بر روي سلول‏هاي مغز استخوان نسبت به ساير غلظت‏ها اثر القايي بيشتري دارد. نتيجه‏گيري: بر اساس يافته‏هاي اين مطالعه، سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي مشتق شده از هر سه منبع در اثر عمل القايي مايع زجاجيه مي‏توانند به سلول‏هاي فيبر عدسي چشم تمايز يابند.

Aim: In this study the effect of vitreous humor on the mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow, adipose tissue and amniotic fluid to lens like cells was investigated. Material and methods: In this experimental study collected stem cells from femurs bone marrow and inguinal fat pads of mature NMRI mice and amniotic fluid of 13 days embryos of NMRI mice were cultured. The mesenchymal character of these cells was proven by flow cytometry markers like CD90, CD31. This experiment took place for 14 days with different dosages 10, 15, 20, 30, 40, 50 % of bovine vitreous humor. Express of crystalline markers were detected by immunocytochemistry in experimental and control groups. Results: The flow cytometric analysis of surface markers were shown expression of CD90 by bone marrow and amniotic fluid stem cells and adipose tissue stem cells (29/29%, 0/57%, 82%, respectively). Moreover, mesenchymal stem cells from these 3 sources had expression of CD31 (3/44%, 1/53%, 0/1%, respectively). Immunocytochemistry results revealed that 40 % vitreous humor in culture media fluid more inducing effect on adipose and amniotic fluid mesenchymal stem cells and 15 % vitreous humor on bone marrow stem cells in order to differentiate. Conclusion: According to the findings of this study, it can be concluded that MSCs derived from all sources can differentiate into lens fiber like cells by inducing effect of vitreous humor. Keywords: Mesenchymal Stem Cells, Vitreous Body, Crystalline