اثرعصاره اتانولي گياه مرزنجوش بر فراسنجه هاي كيفي و غلظت مالون دي آلدهيد اسپرم منجمد يخ گشايي شده گاو هلشتاين

Effect of Origanum vulgare ethanol extract on quality parameters and malondialdehyde concentration of cryopreserved Holstein bull sperm

زمينه مطالعاتي: مراحل مختلف عمل آوري، نگهداري و انجماد مني، بدليل ايجاد استرس هاي فيزيولوژيكي و شيميايي در سطح غشاي اسپرم، باعث كاهش كيفيت اسپرم منجمديخ گشايي شده مي شود. براي مقابله با اين مشكل استفاده از آنتي اكسيدان ها از اهميت ويژه اي برخوردار است. هدف: هدف اين مطالعه بررسي تاثير عصاره گياه مرزنجوش بعنوان آنتي اكسيدان طبيعي، بر پارامترهاي ميكروسكوپي و بيوشيميايي اسپرم منجمد-يخ گشايي شده گاو هلشتاين بود. روش كار: در اين تحقيق از 3 راس گاو هلشتاين، دو بار در هفته، توسط واژن مصنوعي اسپرم گيري شده و جهت از بين بردن اثرات فردي دام ها، انزال ها در نسبت هاي مساوي با هم مخلوط شدند. سطوح مختلف عصاره گياه مرزنجوش (2، 4، 8، 12، 16، 20 ميلي ليتر در دسي ليتر محلول رقيق كننده) به رقيق كننده بر پايه زرده تخم مرغ-سيترات افزوده شد. نمونه ها پس از طي مراحل سردسازي و تعادل، در معرض بخار نيتروژن مايع، منجمد و تا زمان ارزيابي در داخل ازت مايع نگهداري شدند. بعد از يخ گشايي، پارامترهاي تحرك، زنده ماني، يكپارچگي غشا و پراكسيداسيون ليپيد به ترتيب توسط سيستم كاسا، رنگ آميزي ايوزين-نيگروزين، محلول هيپواسموتيك و اندازه گيري غلظت مالون دي آلدييد ارزيابي شدند. نتايج نشان داد كه افزودن سطح 4 ميلي ليتر در دسي ليتر از عصاره مرزنجوش باعث بهبود معني دار پارامترهاي تحرك، زنده ماني و يكپارچگي غشاي پلاسمايي اسپرم ها، بعد از فرآيند انجماد-يخ گشايي در مقايسه با گروه شاهد شده و نيز ميزان پراكسيداسيون ليپيد را نسبت به گروه شاهد بطور معني داري (05/0(P < كاهش داد. نتيجه گيري نهايي: بررسي ما تاثير مثبت عصاره مرزنجوش در سطح 4 ميلي ليتر بر دسي ليتر بر كيفيت اسپرم منجمد-يخ گشايي شده گاو را تاييد مي كند.

BACKGROUND: Various stages of processing, storage and cryopreservation of semen, reduce frozen-thawed sperm quality due to physiological and chemical stress on the sperm membrane, decreasing sperm quality. To overcome this problem, utilization of antioxidants can play an important role. OBJECTIVES: The purpose of this study is to investigate the effect of Origanum Vulgare extract as a natural antioxidant on microscopic and biochemical parameters of frozen-thawed Holstein bull sperms. METHODS: In this study, semen samples were collected from three mature Holstein bulls twice a week using artificial vagina and ejaculates were pooled in order to eliminate the individual effects of bulls. Different levels of Origanum Vulgare ethanol extract (2, 4, 8, 12, 16 and 20 ml in 100 ml of diluents solution) were added to diluents based on egg yolk-citrate. Following cooling and equilibration stage of semen samples, the samples were exposed to nitrogen vapor to be frozen and stored in liquid nitrogen until evaluation. Motility, viability, membrane integrity and the lipid peroxidation parameters of the samples were evaluated after thawing, using CASA system, Eosin-Nigrosin staining, hypo osmotic swelling test and measuring malondialdehyde concentration, respectively. RESULTS: The addition of 4 ml/dl of Origanum Vulgare extract improved motility, viability and plasma membrane integrity parameters of spermatozoa significantly and reduced the lipid peroxidation as well compared to the control group, following freeze-thawing process (P < 0/05). CONCLUSIONS: our study confirms the positive effectiveness of adding 4 mL/dL Origanum Vulgare on quality of cryopreserved bull sperm.