بررسي چند شكلي اگزون 4 ژن هورمون رشد و ارتباط آن با صفات رشد در گوسفندان نژاد كرماني با روش PCR-SSCP

Investigation of Polymorphism in Exon 4 of GH Gene and Its Association with Growth Traits in Kermani Sheep using PCR- SSCP

در اين مطالعه، از تعداد 109 راس گوسفند كرماني مربوط به ايستگاه اصلاح نژاد گوسفند كرماني (شهر بابك)، از سياهرگ گردن خونگيري به عمل آمد و استخراج DNA به روش نمكي بهينه يافته و واكنش هاي زنجيره اي پليمراز جهت تكثير يك قطعه 214 جفت بازي از اگزون 4 ژن هورمون رشد انجام گرفت. از چندشكلي فضايي تك رشته هاي DNA(SSCP) براي تعيين ژنوتيپ نمونه ها، استفاده شد الكتروفورز عمودي نمونه ها روي ژل اكريل آميد 12% به مدت 17 ساعت و با اختلاف پتانسيل 300 ولت در دماي 4 درجه سانتي گراد صورت گرفت. رنگ آميزي ژل به روش نيترات نقره انجام شد كه در نتيجه آن الگوهاي ژنوتيپي 3،2،1 به ترتيب با فراواني 18/20%، 77/35% و 03/44% مشاهده شد. آناليز واريانس صفات با نرم افزار SAS انجام گرفت. ارتباط الگوهاي متفاوت ژنتيكي با صفات رشد (وزن تولد، وزن 3 ماهگي، وزن 6 ماهگي، وزن 9 ماهگي و وزن 12 ماهگي) معني دار نبودند.

In this study, blood samples were collected from the jugular vein of 109 Kermani sheep from Kermani sheep breeding station. Genomic DNA was extracted from blood sample using modified salting out method and polymerase chain reactions were performed for amplification of 214 bp fragment containing a part of exon 4 of GH gene. Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) was used for genotyping. For this purpose, vertical electrophoresis of PCR products was performed on 12% acrylamide gel, at 300 V, for 17 h at 4 C?. Silver-staining of gels, resulted three genotypic patterns of 1, 2 and 3 with frequencies of 20.18%, 35.77% and 44.03%, respectively. Analysis of variance was performed using SAS software. The results showed no significant association between the different patterns of GH gene and growth traits.