تاثير ترشحات سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان انسان بر بيان ژن‌هاي KGF و TGF-B1 در زخم موش‌هاي صحرايي ديابتي

Effect of Human Bone Marrow-Mesenchymal Stem Cells Conditioned media on KGF and TGF-B1 Genes Expression in Diabetic Rats Wound

زمينه و هدف: التيام زخم فرآيند پيچيده‌اي است كه در بيماران ديابتي به خاطر عوامل مختلفي مختل شده است. تاكنون، تاثير مثبت ترشحات سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي در فرآيند ترميم زخم گزارش شده است. ما در اين مطالعه تاثير ترشحات سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي انسان را بر بيان فاكتورهاي موثر در ترميم زخم بررسي كرديم. مواد و روش ها: 27 سر موش صحرايي به 5 گروه سالم بدون زخم، كنترل سالم، كنترل ديابتي، ديابتي پلاسبو و ديابتي تجربي تقسيم شدند و براي القا ديابت، از آلوكسان استفاده شد. در ناحيه پشت موش‌ها يك زخم ايجاد گرديد. سپس از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي، محيط كشت بهينه تهيه شد. موش‌هاي گروه ديابتي تجربي 200 ميكروليتر محيط كشت بهينه را به صورت تزريق داخل وريدي دريافت نمودند. چهار و هفت روز پس از ايجاد زخم، از زخم‌ها نمونه برداري شد و بيان فاكتورهاي KGF و TGF-B1 به وسيله‌ي تكنيك RT-PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: در گروه ديابتي تجربي بيان ژن KGF در روزهاي چهارم و هفتم، نسبت به گروه كنترل ديابتي افزايش غير معني‌دار يافته بود. در حالي كه بيان ژن TGF-B1 در گروه ديابتي تجربي نسبت به گروه كنترل ديابتي در روز چهارم افزايش معني‌دار (05/0p < ) و در روز هفتم افزايش غير معني‌دار يافته بود. نتيجه گيري: به نظر مي‌رسد استفاده از محيط كشت بهينه مشتق از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي انسان، تاثير مثبتي بر بيان فاكتورهاي تروفيك و التهابي درگير در ترميم زخم پوستي ديابتي داشته باشد.

Background: Wound healing is a complex process that is impaired in diabetic patients due to several factors. So far, the positive effects of mesenchymal stem cells secretions in wound healing process have been reported. In this study, we investigated the effect of human mesenchymal stem cells Conditioned media on expression of effective factors involved in wound healing. Materials and Methods: 27 rats were divided into 5 groups: no wound control, normal control, diabetic control, diabetic placebo and diabetic experimental. Diabetes was induced by Alloxan. A wound was created on the back of the rats. Then, the conditioned medium was prepared from mesenchymal stem cells. Diabetic experimental rats received 200 microliter of conditioned medium intravenously. The wounds were sampled and expression of KGF and TGF-B1 genes was examined by RT-PCR on days four and seven after wounding. Results: In the diabetic experimental group, expression of KGF gene at fourth and seventh days had been non-significantly increased in comparison to diabetic control group. While, expression of TGF-B1 gene in diabetic experimental group compared to diabetic control group had been significantly (p < 0.05) increased on fourth day, and non-significantly increased on seventh day. Conclusion: It seems that using the conditioned medium derived from human mesenchymal stem cells positively affects the expression of trophic and inflammatory factors involved in diabetic skin wound healing.