شناسايي مولكولي و بررسي مقاومت ضدميكروبي سويه‌هاي كمپيلوباكتر جدا شده از لاشه‌ مرغ

Molecular identification and investigation of antimicrobial resistance of Campylobacter spp. isolated from chicken carcasses

چكيده سابقه و هدف: كمپيلوباكتر، از خانواده كمپيلوباكترياسه، يكي از مهم ترين باكتري هاي بيماري زاي روده اي است. هدف از اين مطالعه، جداسازي و توصيف گونه هاي كمپيلوباكتر با منشا طيور براي ارزيابي ميزان مقاومت ضد ميكروبي و بررسي حضور ژن هاي اينتگرون مي باشد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه 70 نمونه سواب ركتال از لاشه‌ي مرغ از يك كشتارگاه در استان تهران، شهر تهران گرفته شد. پس از غني سازي، تعداد 39 سويه كمپيلوباكتر با استفاده از روش هاي بيوشيميايي جداسازي گرديد. از پرايمر طراحي شده cadF (ژن دخيل در اتصال) براي تاييد جنس كمپيلوباكتر و از پرايمرهاي hipO و asp به ترتيب براي تشخيص گونه هاي كمپيلوباكترژژوني و كمپيلوباكتركولاي استفاده شد. از پرايمرهاي int1 و hep2به ترتيب براي شناسايي اينتگرون هاي كلاس 1 و 2 استفاده گرديد. همچنين، تست آنتي بيوگرام براي 10 آنتي بيوتيك با روش ديسك ديفيوژن انجام شد و نتايج بر طبق كتاب CLSI تفسيرشد. يافته‌ها: نتايج حاصل از آزمونPCR نشان مي دهد كه 100% سويه هاي جدا شده در اين مطالعه، متعلق به گونه‌ي كمپيلوباكتر كولاي مي باشند و ژن هاي اينتگرون براي تمامي سويه ها منفي بودند. در ميان 10 آنتي بيوتيك مورد استفاده، بيشترين مقاومت مربوط به كوتريموكسازول (36/97%)، ناليديكسيك اسيد (8/94%)، سيپروفلوكساسين (7/87%)، استرپتومايسين (72/89%) و تتراسايكلين (4/97%) مي باشد و هيچ گونه مقاومتي نسبت به جنتامايسين ديده نشد. نتيجه‌گيري: نتايج نشان داد كه سويه هاي مورد بررسي در اين مطالعه مقاومت بالايي به عوامل ضد ميكروبي نشان مي دهند اما با توجه به منفي بودن ژن هاي اينتگرون، آنها نقش مهمي در مقاومت در برابر سويه هاي كمپيلوباكتر در مطالعه حاضر بازي نمي كنند. با اين حال احتمال دخالت ساير مكانيسم هاي مقاومت در ظهور فنوتيپ مقاومت چند دارويي اين سويه ها در انسان و طيور وجود دارد.

Abstract: Background and Aim: Campylobacter belongs to Campylobacteraceae family and is one of the most important intestinal pathogenic bacteria. The aim of the present study was to isolate and characterize the Campylobacter spp. of poultry origin in order to assess the rate of antimicrobial resistance and to investigate the presence of integron genes. Materials and Methods: In this study, 70 rectal swab samples from chicken carcasses were collected from a slaughterhouse in Tehran. After enrichment, 39 Campylobacter spp. were isolated, which were identified by convention biochemical tests and confirmed by a genus (cadF) and species (asp, hipO) specific polymerase chain reaction (PCR), and the primers int1 and hep2 were used to identify the class1 and class2 integrons, respectively. Moreover, antibiogram was performed by disc diffusion method, and the resistance pattern of isolates was interpreted according to the CLSI guidelines. Results: The results showed that all of the isolates were C. coli (100%), and the integron genes were negative among all of the isolates. Among 10 antibiotics were used, the maximum resistance was seen to Co-trimoxazole (97.36%) and Nalidixic acid (94.8%), Ciprofloxacin (87.7%), Streptomycin (89.72%), and Tetracycline (97.4%). No resistance was seen to Gentamicin. ‍Conclusion: The results indicated that strains under study showed high resistance to antimicrobial agents. Regarding the absence of integrons, it can be concluded that they do not play an important role in the resistance to these Campylobacter isolates. However, it can be proposed that other resistance mechanisms are involved in the emergence of multi-drug resistance (MDR) phenotype in this genus.