بررسي فعاليت ليزكنندگي پروتيين‌هاي تانتاكولي شقايق دريايي haddoni Stichodactyla

Assessment of hemolytical activity of proteins from tentacles of sea anemone, Stichodactyla haddoni

زمينه: موجودات دريايي از جمله شقايق‌هاي دريايي منبعي قوي از ساختار‌هاي جديد و تركيبات‌زيست فعال هستند. تانتاكول‌هاي اين آبزيان انواعي از پپتيد‌ها و پروتيين‌ها را توليد مي‌كنند كه به عنوان سموم نوروتوكسين و سيتوليزين عمل مي‌كنند. سيتوليزين‌ها به دليل خاصيت ليز كنندگي‌شان و امكان اثر آن‌ها بر روي بافت‌هاي خاص به عنوان عناصر ضد‌ توموري و حتي ضد‌انگلي شناخته مي‌شوند. مواد و روش‌ها: نمونه‌برداري شقايق دريايي Stichodactyla haddoni در آبان ماه سال 91 در يك جزر كامل از منطقه بين جزر و مدي سواحل جزيره هرمز انجام گرفت. نمونه‌ها بعد از فريز شدن به آزمايشگاه منتقل شدند. بخش تانتاكولي نمونه‌ها با استفاده از PBS عصاره‌گيري شد. پپتيد‌هاي پايين و بالاي 10 كيلودالتون به وسيله فيلتر MWCO 10000 ميلي‌پور جدا شد و فعاليت هموليتيك به وسيله متد ميكروهمولتيك بر روي گلبول‌هاي قرمز خون انسان، ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان Oncorhynchus mykiss و ماهي كپور معمولي Cyprinus carpio مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: در اين بررسي، تشكيل سوسپانسيون قرمز رنگ به عنوان هموليتيك مثبت، توصيف شد. عصاره خام، پپتيدهاي بالاي 10 كيلودالتون و پپتيد‌هاي پايين 10 كيلودالتون در غلظت‌هاي مختلف خواص ليزكنندگي را بر روي سلول‌هاي خوني به صورت متفاوت نشان دادند و از طرفي مقايسه فعاليت ليزكنندگي عصاره خام، پپتيد‌هاي بالا و پايين 10 كيلودالتون بين سه نمونه خوني، فعاليت ليزكنندگي بيشتر را بر روي خون انسان سپس بر روي كپور معمولي و نهايتاً بر روي خون قزل‌آلاي رنگين‌كمان ايجاد كردند. نتيجه‌گيري: عصاره خام PBS و پپتيد‌هاي بالا و پايين 10 كيلودالتون داراي خواص ليز‌كنندگي بر روي خون انسان و ماهي كپور معمولي و قزل‌آلاي رنگين‌كمان هستند كه اين فعاليت هموليزي با توجه به نوع خون متفاوت است و بيشترين فعاليت هموليزي بر روي خون انسان است.

Background: Sea anemone is ocean dwelling and typically organisms sessile. These tentacles produce a variety of peptides and proteins that act as, neurotoxins and cytolysins toxins. Cytolysins due to their effect on specific tissue and lysing properties are known as antiparasitic or antitumor compounds. Materials and Methods: Sea anemone Stichodactyla haddoni were collected from the coast of Hormuz Island in November 2012 and tentacles extraction was performed by using of saline PBS solvents. Peptides above 10kDa and peptides below 10kDa were separated by amicon® Ultra-15 10K device. The hemolytic activity was assessed by the micro hemolytic method for human, rainbow trout Oncorhynchus mykiss and common carp Cyprinus carpio erythrocytes. Results: Uniform red color suspension in the wells considered as positive hemolysis. The crude extracts, peptides above 10kDa and peptides below 10kDa at various concentrations were showed hemolytic effect on human, common carp Cyprinus carpioand rainbow trout Oncorhynchus mykiss erythrocytes. Conclusion: The crude extract, peptides above 10kDa and peptides below 10kDa have a hemolytic effect on human erythrocytes and two species of fish. The venoms showed the most hemolytic activities on human blood among others.