تشخيص سريع عامل بيماري لوك اروپايي (مليسوكوكوس پلوتونيوس) در كلني هاي زنبور عسل با روش PCR

Rapid detection of Melissococcus Plotinus the agent of European foulbrood in honey bee colonies by PCR*

مقدمه : بيماري لوك اروپايي، بيماري نوزادان زنبور عسل مي باشد. اين بيماري از جمله بيماريهاي خطرناك براي كلني هاي زنبور عسل محسوب مي شود و در اثر باكتري گرم مثبت مليسوكوكوس پلوتونيوس ايجاد مي گردد. اين بيماري به صورت گسترده اي در جهان پراكنده است و در برخي از نواحي مشكلات فزآينده اي را ايجاد مي نمايد. پيشرفت هاي اخير در تكنولوژي مولكولار، تشخيص هويت باكتري را بسيار سهل و آسان نموده است و تكنولوژي تشخيص اسيدهاي نوكلييك بسرعت جايگزين روش سنتي ميكروبيولوژي شده است. هدف اين مطالعه راه اندازي روش PCR براي تشخيص سريع و مطمين اين بيماري در ايران بوده است. از سوي ديگر دخالت عوامل ثانويه باكتريايي موجب شدت و تنوع در بروز علايم باليني بيماري شده و تشخيص آزمايشگاهي را در مواردي با مشكل مواجه مي سازد. بيماري لوك اروپايي در فهرست بيماريهاي خطرناك براي بهداشت دامها قرار دارد و در بسياري از مناطق بيماري بومي بوده و اپيدمي هاي فصلي ايجاد مي كند. روش كار: با استفاده از سويه باكتري استاندارد و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي،PCR راه اندازي گرديد. محصول PCR روي ژل آگارز 1 درصد الكتروفورز شد.همچنين با مراجعه به زنبورداريهاي مشكوك به اين بيماري از 12 زنبورستان لاروهاي زنبور عسل جمع آوري گرديدند. نمونه ها همزمان با روش كشت باكتريايي و روش PCR مورد آزمايش قرار گرفتند. نتايج: از 12 نمونه اخذ شده اززنبورستان هاي مشكوك، 8 نمونه در PCR مثبت و 2 نمونه در كشت مثبت شد.