تفكيك دو سويه تجاري ماهي قزل آلاي ايراني و فرانسوي با استفاده از تكنيك PCR-RFLP

Identification of two commercial strains of Iranian and French rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) using PCR-RFLP technique

به منظور شناسايي چندشكلي (پلي مورفيسم) موجود در ژن هورمون رشد در ماهي قزل آلاي رنگين كمان، تعداد 20 نمونه ي مختلف از دو نژاد ايراني و فرانسوي تهيه و استخراج DNA به روش CTAB انجام گرفت. واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) جهت تكثير قطعه bp1825 ژن هورمون رشد انجام و قطعه تكثير شده با استفاده از آنزيم هاي شاخص (Tag I، Hinf I،Mbo 1، Alu I، Hin III، Hpa II و Nde I) تحت هضم آنزيمي و الكتروفورز با ژل آگارز 3 درصد قرار گرفت. در بررسي برش آنزيمي محصول PCR، دو آنزيم Tag I و Alu I توانستند چندشكلي در الگوي برش آنزيمي در ناحيه bp450 و bp600 در آنزيم Alu I وbp 500 در آنزيم Tag I مابين جمعيت ماهيان ايراني و فرانسوي را نمايان سازند. بر اساس نتايج، به نظر ميرسد كه آنزيم هاي AluI و Tag I ميتوانند به عنوان ماركرهاي مولكولي مناسب براي شناسايي اين دو جمعيت استفاده شده و در صنعت آبزي پروري براي تشخيص دو جمعيت قزل آلاي وارداتي و بومي مفيد واقع گردند.

In order to identify polymorphisms in the growth hormone gene for rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), a total of 20 different samples were prepared from both Iranian and French populations and DNA extraction was performed using CTAB method. The polymerase chain reaction (PCR) was amplified fragment of 1825 bp the growth hormone gene. The amplified fragments were using enzymes including. Tag I, Hinf I, Mbo1, AluI, HinIII, HpaII and NdeI and fractionated on the 3% agarose gelelectrophoresis. In enzymatic digestion of the PCR products, Alu I and Tag I enzymes show polymorphism with a new pattern in 450 and 600 bp (by Alu I) and a new 500 bp (by TagI) which was different among Iranian and French populations. According to the present results, we could suggest that the enzymes AluI and TagI can be used as molecular markers for the identification of these two populations; and also be useful to distinguish between imported and native trout populations in aquaculture industry.