جداسازي و شناسايي مايكوباكتريوم بويس از نمونه‌هاي كشتارگاهي گاوهاي توبركولين مثبت استان اصفهان با استفاده از كشت ميكروبي و تعيين هويت بيوشيميائي

Detection and recognition of Micobacterium tuberculosis in PPD positive cattle by microbacterial culture and biochemical tests in Esfahan province

علیرغم اجرای طولانی برنامه مبارزه با سل گاوی در ایران، این بیماری همچنان به عنوان یك مشكل بزرگ باقی مانده است و سبب ایجاد ضررهای اقتصادی گسترده می‌شود. در این مطالعه جداسازی مایكوباكتریوم بوویس، عامل ایجادكننده سل گاوی، از گاوهای رآكتور(توبركولین مثبت) كشتارشده در استان اصفهان مورد بررسی قرار گرفته است. در فاصله زمانی 1385تا 1388 عقده‌های لنفاوی مزانتریك و مدیاستینال همراه با نمونه‌های پاتولوژیك (در صورت وجود) از143راس گاو بر روی محیط كشت اختصاصی لونشتاین- جانسون گلیسیرین دار و لونشتاین- پیرووات دار كشت داده شد. تعداد 28 جدایه دارای ویژگی‌های رشد مایكوباكتریوم‌ها نظیر برخورداری از خاصیت اسید فست بودن در میكروسكوپی، توسط یك الگوریتم استاندارد بیوشیمیایی متشكل از آزمایش‌های رشد ترجیهی بر روی محیط كشت بیرووات دار،كاتالاز، تولید نیاسین، احیاء نیترات، رشد در محیط حاوی تیوفن كربوكسیلیك هیدرازید اسید (TCH) و تولید كورد فاكتور، مورد بررسی قرار گرفتند. در نتیجه تمام 28 جدایه به عنوان مایكوباكتریوم بوویس شناسایی شدند. این جدایه‌ها از 8 واحد گاوداری در نواحی مختلف استان اصفهان جمع‌آوری شده بودند كه از میان آنها 15 جدایه مربوط به یك گله در بهارستان و دو گله دیگر هر یك با 4 جدایه بودند. 5 جدایه باقیمانده از 5 گاوداری در مناطق دولت آباد، نجف آباد، تیران، گلشهر و قلعه شور اصفهان جداسازی شدند. جداسازی م.بوویس به عنوان تنها پاتوژن مایكوباكتریایی عامل بیماری در گاوان رآكتور اصفهان نشانه تاییدكننده دیگری است دایر بر اینكه دیگر اعضاء كمپلكس م.توبركولوزیس نقشی در اپیدمیولوژی سل گاوی در این استان ندارند، همچنان كه این مشاهده در مورد دیگر استان‌های ایران نیز موضوعیت دارد. در سه مورد از 8 گاوداری مورد بررسی در این بررسی 4 جدایه م. بوویس و یا بیش از آن از هر گله جمع‌آوری گردید كه این امر نشانه وقوع همه‌گیری بیماری در این گله‌ها می‌باشد. پاسخ به این سؤال كه آیا یك سویه واحد یا چندین سویه در بروز اپیدمی در این گله‌ها دخالت داشته اند نیازمند انجام بررسی‌های دقیق مولكولار اپیدمیولوژی خواهد بود.

Despite the long-run anti bovine tuberculosis (BTb) scheme in Iran, BTb remains a major problem in the national cattle farming that causes substantial economical loss. In this search (2006-2009), isolation of Mycobacterium bovis, the causative agent of BTb,from tuberculin positive (reactor) cattle slaughtered in Isfahan has been addressed. Mesenteric and mediastinal lymph nodes along with pathological specimens(if present) from 143 cattle were cultured on Lownstein-Jenson (LJ) slopes. The 28 isolates representing mycobacterial growth characteristics eg. Acid fastness in microscopy, were subjected to a standard biochemical algorythm comprising preferential growth on pyruvate LJ medium, catalase, niacin, nitrate reductase, tiophen carboxylic hydrazide acid (TCH) and production of cord factor tests. Consequently, all the 28 isolates were identified as M. bovis. These isolates originated from 8 farms in different regions of Isfahan province with 15 of them coming from a single herd in Baharestan followed by two more farms with 4 isolates from each. The remaining 5 single isolates were collected from 5 herds in Dolatabad, Najafabad, Tiran, Golshar and Ghaleh Shour regions. Isolation of M. bovis as the single mycobacterial causative pathogen in the recator cattles of  Isfahan is another confirmatory observation that no other member of Mycobacterium tuberculosis complex plays a role, if any, in epidemiology of BTb in Isfahan as is the case with rest of Iran. In three out of the 8 farms studied here, there were 4 or more M. bovis isolates collected from every herd an indication of BTb epidemics in these herds. Whether single strain or multiples strains of M. bovis have been involved in the disease outbreaks in these farms, furher molecular epidemiology work is required.