تشخيص بيوماركرهاي miRNA با استفاده از نانوذرات طلا

Detection of miRNA biomarkers by using Gold Nanoparticles

سابقه و هدف:كشف اخير راجع به اينكه "بيان miRNA غالبا در سرطان دچار تغيير مي‌شود" و از آنجايي كه امروزه سرطان دومين عامل مرگ و مير انسان ها در جوامع بشري است، مسير جديدي از تحقيقات را باز نموده است. در چندين سال گذشته، از رويكرد بسيار متفاوتي نسبت به توسعه انواع روش هاي مختلف تشخيص بيوماركرهاي miRNA استفاده شده است. بطوري كه در طول دهه گذشته پيشرفت‌هاي زيادي در استفاده از روش‌هاي نانو جهت تشخيص مولكولي حاصل شده است. مواد و روش ها:براي تهيه نانوذره هاي طلا، نسبت مشخصي از سديم سيترات و HAuCl43H2O با يكديگر تركيب نموده. ميانگين قطر نانوذره هاي طلا با استفاده از دستگاه زتا سايزر محاسبه شد. سپس نسبت هاي مشخصي اوليگونوكليوتيد به نانوذرات اضافه نموده و نانوپروب ساخته شده در معرض توالي هدف قرار گرفت و نواسانات پلاسمون سطحي با استفاده از دستگاه طيف سنج مريي-فرابنفش بررسي گرديد. يافته ها:ميانگين قطر نانوذرات طلاي سنتز شده با كمك دستگاه زتا سايزر اندازه گيري شد كه 20 نانومتر بدست آمد. غلظت بهينه اوليگونوكليوتيد براي اتصال به نانوذرات با استفاده از دستگاه طيف سنج مريي-فرابنفش حدود pM5 بدست آمد. حد تشخيص اين روش براي miRNA سنتز شده تك رشته اي با طول mer23، در حدود pM5 مي باشد. نتيجه گيري: اين بررسي نشان داد، تهيه نانوذرات طلا با استفاده از روش كاهش سيترات جهت تشخيص بيوماركرهاي miRNA با استفاده از خاصيت SPR نانوذرات طلا ميسر مي باشد.

Aim and Background The recent discovery about the "miRNA expression is frequently altered in cancer," and since it is now the second leading cause of cancer mortality in human society, has opened a new direction of research. In the past several years, a very different approach to the development of various methods for the detection of miRNA biomarkers were used. Over the past decade, so much progress has been made in the use of nanotechnology for molecular diagnostics. Materials and Methods For the preparation of gold nanoparticles, a certain proportion of sodium citrate and HAuCl4 3 H2O combine with each other. The mean diameter of the gold nanoparticles was calculated by using the Zeta sizer. The ratios of specific oligonucleotide was added to the nanoparticles and Nanoprobe made were exposed to target sequences and the fluctuations of surface plasmons was investigated by UV-visible spectrometer. Results The mean diameter of the gold nanoparticles synthesized was measured by zeta sizer about 20 nm, respectively. The optimal concentration of oligonucleotide for binding to nanoparticles were about 5pM that was measured by UV-visible spectrometer. The detection limit of this method for the synthesis of a single strand of miRNA with the 23mer, is about 5pM. Conclusion The study showed that gold nanoparticles prepared by citrate reduction method for detection of miRNA biomarkers by using SPR properties of gold nanoparticles is possible