بررسي بيان نشانگرهاي اختصاصي پرتواني Oct4 و Nanog در بلاستوسيست هاي موش

Expression Levels of Pluripotency Specific Markers, Oct4 and Nanog in IVF derived Mouse Blastocysts

سابقه و هدف: اگرچه امروزه IVF به عنوان يك تكنيك پركاربرد در درمان ناباروري مي باشد، اما مطابق مطالعات صورت گرفته، استرس ايجاد شده به واسطه ي تغييرات اسمزي، اكسيژن، دما و pH در شرايط خارج از رحم مي تواند باعث تغييرات مورفولوژيكي، ژنتيكي و اپي ژنتيكي در جنين هاي برون تني نسبت به حالت درون تني گردد. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثير IVF بر كيفيت جنين-ها از طريق ارزيابي نرخ زنده ماني و رشد و هم چنين بررسي ميزان بيان ژن هايOct4 و Nanog موثر در پرتواني توده سلولي داخلي بلاستوسيست مي باشد مواد و روش ها: در اين آزمايش بلاستوسيست هاي 5/4-5/3 روزه ي موش در دو گروه بررسي شدند. در گروه تيمار بلاستوسيست هاي برون تني با گذشت 100 ساعت از لقاح اسپرم و تخمك حاصل گشتند. بلاستوسيست هاي درون تني تيمار نشده نيز به عنوان گروه كنترل در نظر گرفته شدند. در هر دو گروه، نرخ زنده ماني و ميزان خروج بلاستوسيست ها از زونا و هم چنين ميزان بيان ژن Oct4، و Nanog، توسط تكنيك Real-time PCR بررسي شدند. يافته ها: اگرچه ميزان خروج بلاستوسيست از زونا نسبت به كنترل داراي كاهش معني داري بود (40/10± 73/67% در مقابل 80/5± 88/86%) اما ميزان زنده ماني در بلاستوسيست هاي برون تني مانند گروه كنترل همچنان 100% باقي ماند. هم چنين بيان ژن هاي Nanog و Oct4 در بلاستوسيست هاي برون تني نسبت به گروه كنترل داراي افزايش بود. بحث: اين مطالعه نشان داد كه لقاح آزمايشگاهي مي تواند بر خروج بلاستوسيست از زونا و بيان ژن تغيير ايجاد كند. نتيجه گيري:با توجه به نتايج حاصل، لقاح آزمايشگاهي مي تواند باعث تغيير بيان ژن و كيفيت در رويان گردد.

Aims and Background: Since the birth of the first baby using In vitro fertilization (IVF) in 1978, huge changes have been established in the field of reproductive biology and infertility treatment. Although IVF is considered as a useful technique, but studies have shown that during IVF, some stresses induced by osmosis, oxygen, temperature and pH changes in ectopic conditions can cause morphological, genetic and epigenetic changes in embryos derived from IVF compared to the In vivo. The purpose of this study was to assess the effect of IVF in embryo quality regarding the survival and hatching rates and the expression level of Oct4 and Nanog genes. These genes are effective in the pluripotency of blastocyst inner cell mass. Materials and Methods: In this experiment 3.5 to 4.5 days old mouse blastocysts were studied in two groups. In treated group, In vitro blastocysts were obtained by passing 100 hours after In vitro fertilization of sperms and oocytes. Fresh blastocysts were also considered as control group. Survival and hatching rates and also Oct4 and Nanog genes expression level were evaluated using Real Time PCR technique in both groups. Results: Although the hatching rate of blastocysts decreased significantly in treated group (67.73 ± 5.80 vs. 86.88 ± 10.40%), the survival rate was remained 100% as well. In addition Oct4 and Nanog genes expression level was significantly increased in, In vitro blastocyst compared to the control group.