ارزيابي بيان ژن آسپارتيك پروتييناز واكويلي (VAP) در سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس جدا شده از بيماران مبتلا به كانديديازيس منتشر

Evaluation of Vacuolar Aspartic Proteinase (VAP) Gene Expression in Candida albicans Strains Isolated from Systemic Candidiasis Patients

مقدمه و هدف: پروتييناز واكويلي يك آنزيم آسپارتيك در كانديدا آلبيكنس است كه توسط ژن VAP بيان مي‌شود و نقش مهمي در ايجاد كانديديازيس سيستميك بازي مي‌كند. هدف اين مطالعه ارزيابي بيان ژن VAP در سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس جدا شده از بيماران مبتلا به كانديديازيس منتشر بود. روش كار: ارزيابي بيان ژن VAP با استفاده از روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز- ترانس‌كريپتاز معكوس (RT-PCR) انجام شد و نمونه‌ها بر روي ژل آگارز 5/1 درصد الكتروفورز شدند. همچنين 48 سر موش ماده Balb/c (6 هفته سن و وزن 25 گرم) به صورت تجربي با سويه‌هاي مختلف كانديدا آلبيكنس عفوني شدند و ميزان بيان ژن VAP در مخمرهاي جدا شده از خون موش‌هاي عفوني سنجش شد. نتايج: ميزان بيان ژن VAP در سويه‌هاي مالزيايي به طور معناداري بيشتر از سويه‌هاي ايراني بود (05/0P < ). نتايج ما افزايش بيان ژن VAP سويه هاي كانديدا آلبيكنس جدا شده از خون موش‌ها در مقايسه با بيماران انساني را نشان دادند. يك تفاوت معناداري در نسبت ژنهاي VAP به 18S rRNA هم در سويه‌هاي باليني و و هم سويه‌هاي كنترل كانديدا آلبيكنس جدا شده از بيماران مالزيايي در مقايسه با بيماران ايراني مشاهده شد (05/0 P < ). باندهاي VAP و 18S rRNA پس از الكتروفورز سويه‌هاي باليني كانديدا آلبيكنس به دست آمده از بيماران انساني و خون موش‌ها ظاهر شدند كه به ترتيب حدود bp 220 و 302 بودند. نتيجه‌نهايي: ژن VAP به عنوان مولد پروتييناز مي‌تواند به ‌عنوان يك ژن مهم در ايجاد كانديديازيس منتشر ناشي از كانديدا آلبيكنس عمل نمايد.

Introduction & Objective: Vacuolar proteinase is an aspartic enzyme in Candida albicans (C. albicans) that is expressed by VAP gene and plays an important role in the development of systemic candidiasis. The aim of this study was to evaluate VAP gene expression in C. albicans strains isolated from patients with systemic candidiasis. Materials & Methods: The evaluation of VAP gene expression was performed using reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) method and samples were electrophoresed in 1.5% agarose gels. In addition, a total of 48 female Balb/c mice (six-weeks old and weight of 25 g) were experimentally infected by various C. albicans strains and the level of VAP gene expression was assessed in yeasts obtained from the blood of infected mice. Results: The level of VAP gene expression in non-Iranian strains was significantly higher than those of Iranian strains (P < 0.05). Our results showed that VAP gene expression of C. albicans strains isolated from mice blood increased compared to human patients. A significant differ-ence in the ratio of VAP to 18S rRNA genes was observed in both clinical and control strains of C. albicans isolated from non-Iranian patients compared to Iranian patients (P < 0.05). The VAP and 18S rRNA bands were appeared after electrophoresis of the clinical strains of C. albicans obtained from human patients and mice blood that were about 220 and 302 bp, re-spectively. Conclusion: VAP gene as producer proteinase can act as an important gene in the development of systemic candidiasis caused by C. albicans. (Sci J Hamadan Univ Med Sci 2016; 23 (2):103-109)