تاثير نانو ذرات نقره و القاي جريان الكتريسته مستقيم در كشندگي پروماستيگوت‌هاي ليشمانيا ماژور در شرايط برون تني

The Killing effect of Silver Nanoparticles and Direct Electric Current Induction on Leishmania major Promastigotes In Vitro

ليشمانيا ماژور يكي از عوامل مهم ليشمانيوز جلدي در بسياري از كشور‌ها از جمله ايران است. در مطالعه حاضر تاثير مصرف همزمان نانو ذرات نقره و القاي جريان الكتريسته در كشندگي ليشمانيا ماژور در محيط كشت بررسي شد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، اثر غلظت‌هاي مختلف نانو ذرات نقره در شرايط برون تني عليه پروماستيگوت ليشمانيا ماژور بررسي شد. سپس ميزان ممانعت از رشد نانو ذرات محاسبه شد. در مرحله دوم، اثر كشندگي نانو ذرات نقره به تنهايي يا در تركيب با 3 ميلي‌آمپر جريان الكتريسته مستقيم در محيط كشت پروماستيگوت به‌مدت 10 دقيقه بررسي و سپس ميزان بقاي پروماستيگوت‏ها با استفاده از آزمون MTT محاسبه شد. نتايج: پس از گذشت 24، 48 و 72 ساعت از كشت انگل، شمارش تعداد انگل نشان داد كه در حضور غلظت‏هاي مختلف نانو ذرات نقره با گذشت زمان تعداد پروماستيگوت‌ها كاهش مي‌يابد كه تعداد آن‌ها در مقايسه با گروه كنترل معني‌دار بود (05/0P < ). ميزان ممانعت از رشد نانو ذره نقره 48 ساعت پس از كشت 8/39 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر به‌دست آمد. نانو ذرات نقره در غلظت 160 ميكروليتر در ميلي‌متر پس از 10 دقيقه مصرف به تنهايي باعث مرگ و مير 5/33 درصد و همراه با القاي 3 ميلي‌آمپر جريان مستقيم الكتريسيته باعث مرگ و مير 100 درصد پروماستيگوت‌ها شد. نتيجه‌گيري: استفاده از نانو ذرات نقره گرچه سبب كشتن پروماستيگوت‌هاي ليشمانيا ‌مي‌شود ولي صد در صد آن‌ها را از بين نمي‌برد. ولي با استفاده همزمان جريان الكتريسته و نانو ذرات نقره، ميزان مرگ و مير پروماستيگوت‏ها به شدت افزايش ‌مي‌يابد.

Worldwide, Leishmania major is one of the major causes of cutaneous leishmaniasis, including Iran. In the present study we investigate the effect of a direct electricity current in combination with silver nanoparticle on the killing of Leishmania major in vitro. Methods: We evaluated the effects of different concentrations of silver nanoparticles against Leishmania major promastigotes in vitro, then the half maximal inhibitory concentration (IC50) of the nanoparticles was determined. In the second step, the killing effect of silver nanoparticles alone or in combination with 3mA of direct electric current was assessed in promastigote cultures for 10 minutes. Next, we evaluated the survival rate of treated promastigotes with the MTT assay. Results: The parasite count showed that the various concentrations of silver nanoparticles significantly decreased the numbers of live promastigotes over time compared with the control group after 24, 48 and 72 hours of culture. The IC50 of the nanoparticles was 39.8 µg/ml after 48 hours of cultivation. Promastigote mortality occurred in 33.5% with the use of silver nanoparticles alone at concentrations of 160 µg/ml and 100% when combined with 3 mA direct current electricity after 10 minutes. Conclusion: Silver nanoparticles alone did not completely kill Leishmania major promastigotes. However, the combined use of both direct current electricity and silver nanoparticles had a significant synergistic effect on promastigote mortality.