جداسازي و شناسايي باكتري سايكروتروف تجزيه كننده نشاسته و مطالعه بر روي ويژگيهاي آميلوليتيك آن

Isolation and identification of an Amylolytic psychrotrophic bacterium and characterization of the Amylolytic activity of the isolate

باكتري سايكروتروف تجزيه كننده نشاسته از نمونه هاي خاك جمع آوري شده از حومه جنوب غربي تهران جداسازي شد. با استفاده از روشهاي بيوشيميايي و مولكولي براساس تعيين توالي ژن 16S rDNA اين باكتري به عنوان گونه ايي از جنس اگزيگوآباكتريوم شناسايي و تحت عنوان اگزيگوآباكتريوم سويه SH3 نام گذاري گرديد. اين باكتري در دماهاي 4، 30، 37، و 48 درجه قادر به رشد و توليد آنزيمهاي آميلوليتيك بود. دماي بهينه براي توليد آنزيمهاي آميلوليتيك توسط اين باكتري 30 درجه سانتي گراد و pH بهينه 7 تعيين شدند. اين باكتري قادر بود نشاسته اضافه شده (1 درصد) به محيط كشت را در مدت 9 ساعت به طور كامل تجزيه نمايد. سوپرناتانت محيط كشت باكتري به عنوان منبع خام آنزيم براي بررسي فعاليت آميلازي مورد استفاده قرار گرفت. اين سوپرناتانت در دامنه رسيعي از دماها بين 4 تا 45 درجه، و pH بين 5 تا 9 واجد فعاليت آميلازي بود. دما و pH بهينه براي فعاليت آميلازي به ترتيب 37 درجه و 7pH تعيين شدند. به نظر مي رسد كه آنزيمهاي سازگار با سرما به دليل برخورداري از فعاليت كاتاليتيك زياد براي كاربرد در دماي محيط مثل شستشو و فرآوري غذا نسبت به انواع مزوفيل و گرمادوست از مزيت بيشتري برخوردار هستند.

A psychrotrophic bacterium with amylolytic activity was isolated from soil samples collected from the southwestern suburb of Tehran. Using biochemical tests and a molecular approach based on 16S rDNA sequencing this bacterial isolate was identified as closely related with Exiguobacterium genus. This bacterium designated as Exiguobacterium sp. SH3 was able to grow and produce amylolytic enzymes at 4, 30, 37, and 48 °C. The best temperature for amylase production by this bacterium was 30 °C at which the starch (1%) added as inducer to the culture medium was totally digested during 9 h of culture. The supernatant of culture medium was used as a source of crude enzyme for amylase assay. The amylolytic activity was observed over a wide range of the tested temperatures from 4 to 45 °C and a wide range of the tested pH conditions from 5 to 9. Cold adapted enzymes with high catalytic activity seem to be more efficient than their mesophilic or thermophilic counterparts for applications at ambient temperature such as laundry and food processing.