انتقال T-DNA وايجاد گياه تراريخت داتوره (Datura metel L.)

Optimization of T DNA transformation and transgenic plant production of Datura metel L.

در اين تحقيق، شرايط ايجاد گياه تراريخت از Datura metel L با استفاده از A. tumefaciens حامل پلاسميد pZM1047 شامل ژنهاي NPTII، و بتا گلوكورونيداز (GUS) بهينه گرديد. از سوسپانسيون باكتري جهت انجام co-culture با قطعات برگ استفاده شد و سپس قطعات گياه به محيط باززايي MS حاوي 1 ميلي گرم در ليتر هورمون BAP، 700 ميلي گرم در ليتر سفازولين ، 25 ميلي گرم در ليتر كانامايسين منتقل گرديدند. بعد از20-15 روز كالوسهاي در حال باززايي ظاهر شدند و بعد از انتقال ساقه باززايي شده به محيط MS بدون هورمون ريشه دار شدند. انتقال ژن در گياهان تراريخت با استفاده از PCR مورد تاييد قرار گرفت. نرخ ترانسفورماسيون حدود 13 درصد به‌دست آمد. كه نسبت به درصد گزارش شده توسط محققان قبلي 2 درصد افزايش داشت.

In this study conditions for transformation of Datura metel was optimized. T-DNA from pZM1047 containing GUS and NPTII genes was transferred to Datura plant. Bacterial suspension was used for co culture with leaf segments., the they were transferred to MS medium supplemented with 1 mg/L BAP as regenerated medium. After 15-20 days calli with regeneration marks was appeared. The whole regenerated transgenic plants on kanamycin were checked using PCR. Transformation rate was about 13% which is 2% higher than previous study reported by others. .