توليد تركيبات فنلي دركشت ريشه‌هاي مويين گياه تربچه (Raphanus sativus L.)

Production of phenolic compounds in hairy roots culture of Radish (Raphanus sativus L.)

اگروباكتريوم رايزوژنز سبب ايجاد بيماري ريشه مويين در گياهان مي‌شود. ريشه‌هاي مويين توليد شده توسط آلودگي با اين باكتري، با نرخ بالاي رشد و ثبات ژنتيكي مشخص مي‌شوند. ايجاد ريشه مويين ممكن است سبب تغييراتي در توليد تركيبات ثانويه گياه شود. تركيبات فنلي (فلاونوييدها، تاننها و آنتوسيانينها) از جمله متابوليتهاي هستند كه جز آنتي اكسيدانهاي طبيعي بشمار آمده و در گياه تربچه به مقدار فراوان حضور دارند. در اين مطالعه جهت ايجاد ريشه‌هاي مويين، تراريختي ريزنمونه هاي برگي گياه تربچه با استفاده از دو سويه اگروباكتريوم رايزوژنز (15834(GUS), A4) انجام شد. ريشه‌هاي مويين ايجاد شده با استفاده از آزمون PCR مورد تاييد قرار گرفتند. همچنين ميزان تركيبات فنلي در ريشه‌هاي مويين مورد سنجش قرار گرفت. صحت تكثير قطعات 780 جفت بازي براي ژن rolB و 320 جفت بازي براي ژن GUS در ريشه‌ها بيانگر تراريخت بودن آنها بود. نتايج مقايسه ميانگينها نشان داد كه ميزان تركيبات فنلي در ريشه‌هاي مويين به طور معني داري نسبت به ريشه‌هاي عادي افزايش مي يابد. به نظر مي‌رسد افزايش تركيبات فنلي در ريشه‌هاي مويين نتيجه ورود T-DNA اگروباكتريوم رايزوژنز و برانگيختن پاسخ دفاعي گياه باشد.

Agrobacterium rhizogenes causes hairy root disease in plants. The hairy roots produced by A. rhizogenes infection are characterized by high growth rate and genetic stability. Hairy root induction cause changes in plant Secondary metabolites production. Phenolic compounds (Flavonoids, Tannins and Anthocyanins) are important antioxidants in radish. In this work, for induction of hairy roots, leaf explants transformed with two A. rhizogenes strains (A4 and 15834(GUS)). Generated Hairy roots confirmed with PCR. Also, Phenolic compounds content in hairy roots was measured. Amplification of 780bp fragment for rolB and 320bp for GUS in transgenic roots confirmed the production of hairy roots. Difference of Phenolic compounds between transgenic and non-transgenic roots was significant. Our results indicate that the insertion of A. rhizogenes T-DNA in to the plant genome stimulate plant defense responses and increase the production of Phenolic compounds.