متيلاسيون پروموتر ژنهاي p14, p15 و p16 در مبتلايان ايراني سرطان بافت سنگفرشي مري

Investigation of the aberrant DNA methylation of p14, p15, p16 genes in patients with ESCC in Iran

مطالعات نشان داده است كه متيلاسيون نابه جاي ژنهاي سركوبگرتومور باعث خاموش شدن آنها و درنتيجه كاهش بيان آنها شده و زمينه براي ايجاد سرطان مهيا مي شود. هدف از اين مطالعه، بررسي متيلاسيون سه ژن سركوبگرتومور p15، p14 و p16 در مبتلايان به سرطان بافت سنگفرشي مري (ESCC) و ارتباط آن با خصوصيات دموگرافي و پاتولوژيكي بيماران مي باشد. به اين منظور از 44نفر بيمار ESCC غيرخويشاوند، 44عدد نمونه بافت توموري و 19عدد نمونه سالم (مجاور تومور)تهيه و مورد استخراج DNA وRNA قرار گرفت. سپس باپرايمر اختصاصي حالتهاي متيله وغيرمتيله اين ژنها، واكنش زنجيره اي پليمراز ويژه متيلاسيون(MSPCR) انجام شد. بيان اين ژنها نيزباRT-PCR بررسي گرديد. نتايج نشان داد درميان نمونه هاي توموري، درصد متيلاسيون براي ژنهاي p14، p15 و p16 به ترتيب عبارتست از 53، 9 و 27 درصد و در هيچ يك از نمونه هاي نرمال (مجاور تومور) متيلاسيوني مشاهده نشد و نيز ميزان بيان اين ژنها با ميزان متيلاسيون نسبت عكس داشت (p < 0.05). فراواني متيلاسيون پروموتر ژنهاي p15 و p14 در نمونه هاي توموري SCCE به ترتيب 41، 9 درصد و فراواني وجود متيلاسيون همزمان در ژنهاي p15+p16 و p14+p15 به ترتيب 6/13 و 5/4 درصد بود در حالي كه فراواني متيلاسيون در ژنهاي p14+p16، 9% مشاهده شد (P=0.0036). بدين معنا كه در تمامي بيماران متيله براي ژن p14، متيلاسيون p16 مشاهده شد اما در بيشتر بيماراني كهp15 متيله بود، ژنهاي p14 و يا p16 متيلاسيون نشان نداد. مقايسه اين نتايج با ساير يافته هاي مشابه در جهان، نشان مي دهد وضعيت متيلاسيون ژنهاي p15، p14 و p16 در جمعيت ايراني مورد بررسي ‌در محدوده گزارشاتي از شمال چين قرار دارد. به عبارتي احتمالاً مكانيسمهاي مولكولي و عوامل اتيولوژيك مشابهي مي توانند در بروز سرطان ESCC در اين دو جمعيت (ايران و چين) نقش داشته باشند.

Studies have shown that aberrant methylation of the tumor suppressor genes could be lead to silencing and reducing of their gene expression, consequently occurring the cancer.The aim of this study was investigation of the aberrantDNAmethylation of p14, p15, p16 genes in Iranian patients with Esophageal Squamous cell carcinoma(ESCC) and its association with demographic and pathological characteristics. Therefore we extracted the DNAs and RNAs of44 tumor tissues and 19 normal tissues from 44 unrelated Iranian patients with ESCC. The methylation specific PCR(MSPCR)was performed for both methylated and unmethylated status of these genes and the expression of these genes have done with RT-PCR.The results showed the 53%,9% and 27% methylation for the p14,p15 and P16 genes respectively in the tumor tissues and no methylation frequency in none of the normal sample. Regarding the gene expression, there was an inverse relationship between methylation status and gene expression (p < 0.05). The frequency of methylation of p15 and p14 in tumor samples was 41%,9% respectively and abundance of methylation the p15+p16 and p14+p15, was 6/13%, and 5/4%, respectively, while the frequency of methylation in p14+p16 genes was observed 9% (P = 0.0036). It means that all patients which are methylated for the p14 had the methylation in p16 too while in most patients with p15 methylated, the p14 or p16 methylation was not found. Comparing these results with other reports shows a similarity between the Iranian population and Chinese population (North of China) maybe because of a similar molecular mechanisms and etiology of ESCC cancer in these populations.